应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 合成表征 » 关于葡萄糖检测的问题
101/1返回列表
查看: 2500  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)

[求助] 关于葡萄糖检测的问题 已有1人参与

各位虫友，你们在做葡萄糖检测时，用的是我们平常用的D型葡萄糖吗？还是经过什么处理，最近在做葡萄糖的检测，但是增大葡萄糖的浓度，但是反应溶液还是不变色，求指点。
我是将葡萄糖溶解在磷酸缓冲溶液中，然后加入葡萄糖氧化酶，37℃，保温1h，然后加入醋酸缓冲溶液、TMB、催化剂，继续搅拌，但是溶液就是不变色，这是什么原因呢？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

葡萄糖氧化酶

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
1楼 2015-06-02 22:23:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨梦无声

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
lo@丹丹@ve: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-06-08 18:37:47
肯定不变色啦，葡萄糖氧化酶分解葡萄糖的产物是什么？是过氧化氢和葡萄糖醛酸，双氧水并不能氧化TMB，要氧化TMB必须要把产生的过氧化氢转变成氧化能力更强的羟基自由基，那如何转变？经典的是引入HRP，时髦的有纳米酶，比如严老师07年在Nature子刊上发表的四氧化三铁具有HRP活性。
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-07 17:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-07 17:42:07
肯定不变色啦，葡萄糖氧化酶分解葡萄糖的产物是什么？是过氧化氢和葡萄糖醛酸，双氧水并不能氧化TMB，要氧化TMB必须要把产生的过氧化氢转变成氧化能力更强的羟基自由基，那如何转变？经典的是引入HRP，时髦的有纳米 ...

我是有加入催化剂的，上面有写的，我的催化剂做过累过氧化酶实验，是可以过氧化氢转化为羟基自由基的，我在考虑在是不是在产生过氧化氢的过程中需要避光啊，是不是不避光的话，产生的过氧化氢就会被分解掉呢？求指点
赞一下 回复此楼
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
3楼2015-06-08 16:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨梦无声

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lo@丹丹@ve at 2015-06-08 16:04:18
我是有加入催化剂的，上面有写的，我的催化剂做过累过氧化酶实验，是可以过氧化氢转化为羟基自由基的，我在考虑在是不是在产生过氧化氢的过程中需要避光啊，是不是不避光的话，产生的过氧化氢就会被分解掉呢？求指 ...

不好意思，马大哈没看到你说了催化剂。我觉得不需要太在意避光是否，我做的时候能测出来就是普通的白色小离心管水浴锅水浴能显色。我觉得有几点值得考虑，一，你用来产生羟基自由基的催化剂是否铁基？是的话用磷酸缓冲液可能有影响，因为根据杨秀荣老师有关报道磷酸根会抑制四氧化三铁的活性，你的催化是否有类似情况，可以考虑换醋酸缓冲液。二，是否葡萄糖氧化产生双氧水的时候体积较大，导致在下一步氧化TMB显色的时候加入的酸性缓冲液的pH超出最佳的催化条件，也就是说第一步溶液体积过大，后面再加酸溶液根本就没达到pH 4.0左右的最佳催化条件。三，第二步的显色催化仍让需要37°左右水浴。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2015-06-08 16:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-08 16:22:30
不好意思，马大哈没看到你说了催化剂。我觉得不需要太在意避光是否，我做的时候能测出来就是普通的白色小离心管水浴锅水浴能显色。我觉得有几点值得考虑，一，你用来产生羟基自由基的催化剂是否铁基？是的话用磷酸 ...

我的催化剂的确是铁基的，但是在第一步产生过氧化氢的实验中，文献中提到要在磷酸缓冲溶液中进行，但是加的量很少，只有100微升，然后再显色的时候是加入的醋酸缓冲溶液3ml。而且文献中有报道，如果直接用醋酸缓冲溶液的话会抑制葡萄糖氧化酶的活性。您说的第三点好像是我实验没有做出来的关键，我是放在室温中进行的，这个我改进一下试试。还有您的葡萄糖氧化酶是用什么配的啊，怎么保存的，另外您可以将您刚说的文献发我一下吗？谢谢。
赞一下 回复此楼
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
5楼2015-06-08 16:33:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨梦无声

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lo@丹丹@ve at 2015-06-08 16:33:36
我的催化剂的确是铁基的，但是在第一步产生过氧化氢的实验中，文献中提到要在磷酸缓冲溶液中进行，但是加的量很少，只有100微升，然后再显色的时候是加入的醋酸缓冲溶液3ml。而且文献中有报道，如果直接用醋酸缓冲 ...

那个文献下了不知道扔去哪了，文献太多太杂，找不到了不好意思，我记得好像是RSC分析方法的，你可以去搜一下，是杨秀荣老师用四氧化三铁测磷酸根的。我当时也是用PBS配的，但是我催化剂不是铁基的没考虑。我保持酶是这样的：干粉直接保存-20°就可以了，一旦溶解后我会分装成若干份，也是保存在-20°，然后每次用都是用完其中一份再用另一份，这样可以避免反复冻融导致酶活降低。还有就是溶了尽快做完。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-06-08 16:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-08 16:51:46
那个文献下了不知道扔去哪了，文献太多太杂，找不到了不好意思，我记得好像是RSC分析方法的，你可以去搜一下，是杨秀荣老师用四氧化三铁测磷酸根的。我当时也是用PBS配的，但是我催化剂不是铁基的没考虑。我保持酶 ...

好的，谢谢啦，我知道了，以后又不懂的会再请教你呢，谢谢啦
赞一下 回复此楼
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
7楼2015-06-08 18:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋斗的可可

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-08 16:22:30
不好意思，马大哈没看到你说了催化剂。我觉得不需要太在意避光是否，我做的时候能测出来就是普通的白色小离心管水浴锅水浴能显色。我觉得有几点值得考虑，一，你用来产生羟基自由基的催化剂是否铁基？是的话用磷酸 ...

你好，我想请问一下，你们的葡萄糖氧化酶是买的多少U的啊，在哪买的呢？拜托解答一下吧。
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-14 15:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Besty_2014

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 奋斗的可可 at 2016-04-14 12:32:13
你好，我想请问一下，你们的葡萄糖氧化酶是买的多少U的啊，在哪买的呢？拜托解答一下吧。...

sigma，50KU
回复此楼
finghtig
9楼2018-06-05 15:09:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15927067003

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Besty_2014 at 2018-06-05 15:09:03
sigma，50KU...

您好，我最近也在做类氧化酶的材料，可是加了TMB，醋酸缓冲液和类酶材料，没有出现变蓝的情况，是什么原因呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2018-10-23 15:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lo@丹丹@ve 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 334求调剂 +3 志存高远意在机� 2026-03-16 3/150 2026-03-18 08:34 by lm4875102
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭