应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 合成表征 » 关于葡萄糖检测的问题
101/1返回列表
查看: 2540  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)

[求助] 关于葡萄糖检测的问题 已有1人参与

各位虫友，你们在做葡萄糖检测时，用的是我们平常用的D型葡萄糖吗？还是经过什么处理，最近在做葡萄糖的检测，但是增大葡萄糖的浓度，但是反应溶液还是不变色，求指点。
我是将葡萄糖溶解在磷酸缓冲溶液中，然后加入葡萄糖氧化酶，37℃，保温1h，然后加入醋酸缓冲溶液、TMB、催化剂，继续搅拌，但是溶液就是不变色，这是什么原因呢？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

葡萄糖氧化酶

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
1楼 2015-06-02 22:23:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨梦无声

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
lo@丹丹@ve: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-06-08 18:37:47
肯定不变色啦，葡萄糖氧化酶分解葡萄糖的产物是什么？是过氧化氢和葡萄糖醛酸，双氧水并不能氧化TMB，要氧化TMB必须要把产生的过氧化氢转变成氧化能力更强的羟基自由基，那如何转变？经典的是引入HRP，时髦的有纳米酶，比如严老师07年在Nature子刊上发表的四氧化三铁具有HRP活性。
赞一下 回复此楼
2楼2015-06-07 17:42:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-07 17:42:07
肯定不变色啦，葡萄糖氧化酶分解葡萄糖的产物是什么？是过氧化氢和葡萄糖醛酸，双氧水并不能氧化TMB，要氧化TMB必须要把产生的过氧化氢转变成氧化能力更强的羟基自由基，那如何转变？经典的是引入HRP，时髦的有纳米 ...

我是有加入催化剂的，上面有写的，我的催化剂做过累过氧化酶实验，是可以过氧化氢转化为羟基自由基的，我在考虑在是不是在产生过氧化氢的过程中需要避光啊，是不是不避光的话，产生的过氧化氢就会被分解掉呢？求指点
赞一下 回复此楼
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
3楼2015-06-08 16:04:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨梦无声

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lo@丹丹@ve at 2015-06-08 16:04:18
我是有加入催化剂的，上面有写的，我的催化剂做过累过氧化酶实验，是可以过氧化氢转化为羟基自由基的，我在考虑在是不是在产生过氧化氢的过程中需要避光啊，是不是不避光的话，产生的过氧化氢就会被分解掉呢？求指 ...

不好意思，马大哈没看到你说了催化剂。我觉得不需要太在意避光是否，我做的时候能测出来就是普通的白色小离心管水浴锅水浴能显色。我觉得有几点值得考虑，一，你用来产生羟基自由基的催化剂是否铁基？是的话用磷酸缓冲液可能有影响，因为根据杨秀荣老师有关报道磷酸根会抑制四氧化三铁的活性，你的催化是否有类似情况，可以考虑换醋酸缓冲液。二，是否葡萄糖氧化产生双氧水的时候体积较大，导致在下一步氧化TMB显色的时候加入的酸性缓冲液的pH超出最佳的催化条件，也就是说第一步溶液体积过大，后面再加酸溶液根本就没达到pH 4.0左右的最佳催化条件。三，第二步的显色催化仍让需要37°左右水浴。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2015-06-08 16:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-08 16:22:30
不好意思，马大哈没看到你说了催化剂。我觉得不需要太在意避光是否，我做的时候能测出来就是普通的白色小离心管水浴锅水浴能显色。我觉得有几点值得考虑，一，你用来产生羟基自由基的催化剂是否铁基？是的话用磷酸 ...

我的催化剂的确是铁基的，但是在第一步产生过氧化氢的实验中，文献中提到要在磷酸缓冲溶液中进行，但是加的量很少，只有100微升，然后再显色的时候是加入的醋酸缓冲溶液3ml。而且文献中有报道，如果直接用醋酸缓冲溶液的话会抑制葡萄糖氧化酶的活性。您说的第三点好像是我实验没有做出来的关键，我是放在室温中进行的，这个我改进一下试试。还有您的葡萄糖氧化酶是用什么配的啊，怎么保存的，另外您可以将您刚说的文献发我一下吗？谢谢。
赞一下 回复此楼
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
5楼2015-06-08 16:33:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨梦无声

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lo@丹丹@ve at 2015-06-08 16:33:36
我的催化剂的确是铁基的，但是在第一步产生过氧化氢的实验中，文献中提到要在磷酸缓冲溶液中进行，但是加的量很少，只有100微升，然后再显色的时候是加入的醋酸缓冲溶液3ml。而且文献中有报道，如果直接用醋酸缓冲 ...

那个文献下了不知道扔去哪了，文献太多太杂，找不到了不好意思，我记得好像是RSC分析方法的，你可以去搜一下，是杨秀荣老师用四氧化三铁测磷酸根的。我当时也是用PBS配的，但是我催化剂不是铁基的没考虑。我保持酶是这样的：干粉直接保存-20°就可以了，一旦溶解后我会分装成若干份，也是保存在-20°，然后每次用都是用完其中一份再用另一份，这样可以避免反复冻融导致酶活降低。还有就是溶了尽快做完。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-06-08 16:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lo@丹丹@ve

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-08 16:51:46
那个文献下了不知道扔去哪了，文献太多太杂，找不到了不好意思，我记得好像是RSC分析方法的，你可以去搜一下，是杨秀荣老师用四氧化三铁测磷酸根的。我当时也是用PBS配的，但是我催化剂不是铁基的没考虑。我保持酶 ...

好的，谢谢啦，我知道了，以后又不懂的会再请教你呢，谢谢啦
赞一下 回复此楼
在实现理想的道路上，遇到挫折在所难免，但是只要不放弃，就一定可以实现心中的梦想。
7楼2015-06-08 18:14:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奋斗的可可

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 雨梦无声 at 2015-06-08 16:22:30
不好意思，马大哈没看到你说了催化剂。我觉得不需要太在意避光是否，我做的时候能测出来就是普通的白色小离心管水浴锅水浴能显色。我觉得有几点值得考虑，一，你用来产生羟基自由基的催化剂是否铁基？是的话用磷酸 ...

你好，我想请问一下，你们的葡萄糖氧化酶是买的多少U的啊，在哪买的呢？拜托解答一下吧。
赞一下 回复此楼
8楼2016-04-14 15:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Besty_2014

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 奋斗的可可 at 2016-04-14 12:32:13
你好，我想请问一下，你们的葡萄糖氧化酶是买的多少U的啊，在哪买的呢？拜托解答一下吧。...

sigma，50KU
回复此楼
finghtig
9楼2018-06-05 15:09:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15927067003

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Besty_2014 at 2018-06-05 15:09:03
sigma，50KU...

您好，我最近也在做类氧化酶的材料，可是加了TMB，醋酸缓冲液和类酶材料，没有出现变蓝的情况，是什么原因呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2018-10-23 15:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lo@丹丹@ve 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 初试324 中药学 一志愿天中医 求调剂 +3 李的Lucky 2026-04-10 3/150 2026-04-15 23:54 by 陈皮皮
[考研] 急需调剂 +5 绝不放弃22 2026-04-15 5/250 2026-04-15 23:11 by Tide man
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 22408 312求调剂 +20 门路摸摸 2026-04-14 21/1050 2026-04-15 20:39 by cuisz
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-14 7/350 2026-04-15 14:39 by 黑科技花岗岩
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 54/2700 2026-04-14 18:00 by lhj2009
[考研] 求调剂 +12 璃茉一定上岸 2026-04-10 13/650 2026-04-14 00:08 by Equinoxhua
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +24 好好休息好不好 2026-04-09 27/1350 2026-04-13 22:22 by pies112
[考研] 求调剂288 +7 ioodiiij 2026-04-10 9/450 2026-04-13 08:33 by Hayaay
[考研] 。 +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 346分，工科0854求调剂，专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 282，求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 考研调剂 +26 硕星赴 2026-04-09 27/1350 2026-04-10 22:24 by 猪会飞
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭