| 查看: 1210 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
wosudongyang铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
小球藻中酶活的测定 已有1人参与
|
|
|
小弟在尝试测定小球藻中光合作用相关酶的一些酶活，目前有： 尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(EC 2.7.7.9) 苹果酸脱氢酶 葡萄糖—6—磷酸脱氢酶 这三种一直没有结果； 我测定方法基本就是离心取藻泥，ddH2O 洗涤，液氮研磨，最后按照《工具酶的活力测定》书上的步骤测定， 可是结果都是没有酶活体现，酶反应曲线根本没有变化，不知是何原因？  |
回复此楼» 猜你喜欢
农学0904 312求调剂
已经有3人回复
-
288求调剂
已经有14人回复
-
290求调剂
已经有6人回复
-
材料085601调剂
已经有27人回复
-
272分材料子求调剂
已经有35人回复
-
296求调剂
已经有13人回复
-
广东省 085601 329分求调剂
已经有12人回复
-
材料类284调剂
已经有47人回复
-
材料调剂推荐
已经有8人回复
-
085600材料与化工329分求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求丝状真菌生物量测定方法
已经有6人回复
- 求教大神，蛋白核小球藻如何破壁？
已经有3人回复
- 丝状真菌菌丝体破碎细胞壁，不要胞内酶，求助最简单的实验方法。。。
已经有18人回复
- 求助革兰氏阳性菌的高效破碎方法
已经有12人回复
- 【求助】takara的LA—Taq酶能不能直接用于T载体的连接...？
已经有6人回复
- 【求助】小球藻（细胞壁）破碎方法
已经有11人回复
wosudongyang
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 353.5
- 帖子: 6
- 在线: 5.9小时
- 虫号: 2224585
- 注册: 2013-01-06
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
送红花一朵 
5楼2015-06-01 14:22:50
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2015-06-01 12:49:15
wosudongyang
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 353.5
- 帖子: 6
- 在线: 5.9小时
- 虫号: 2224585
- 注册: 2013-01-06
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
提取应该没问题吧，别的还有几种酶能测出来，步骤的话是： 1. 加Tris-HCl缓冲液 2. 加MgCl2溶液 3. 加NADP+溶液 4. 加尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖溶液 5. 加a-葡萄糖磷酸变位酶溶液 6. 加葡萄糖—6—磷酸脱氢酶溶液 7. 加入待测液（空白管加纯水） 8. 迅速加入无机焦磷酸盐溶液， 立即混匀开始计时 在30℃恒温条件下，如上表加试剂，反应总体积为1.0ml。然后使用紫外分光光度计，选择波长未340nm，测定光吸收值。以纯水校正光吸收到0点，每隔半分钟读取各管光吸收（A），共读3min，以A对时间作图，取反应最初线性部分，计算出每分钟A的增加值为ΔA340nm/分=ΔA样/分-Δ空/分 |
3楼2015-06-01 14:11:52
calorimetry
铜虫 (正式写手)
- 应助: 51 (初中生)
- 金币: 126.8
- 红花: 13
- 帖子: 569
- 在线: 36.5小时
- 虫号: 3901654
- 注册: 2015-06-01
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
| 我初步看，好像还没有明显的问题。你适当调整一下酶的反应温度和适当温和操作混合一下酶和底物，并且改变酶的浓度。我今天我这里没有带酶的活性测定手册，我明天查一下实验手册。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
4楼2015-06-01 14:21:17
20
