| 查看: 3419 | 回复: 8 | ||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||
caichenggu铁虫 (小有名气)
|
[求助]
毕赤酵母GS115表达，用博来霉素筛选对照和转化都长菌落是什么原因？ 已有2人参与
|
|
| 我用毕赤酵母GS115表达蛋白，用化学转化法转化以后，转化和对照都长出了很多菌落，刚开始怀疑是抗生素的问题，现在换了新买的还是老样子，不知道问题出在哪里，各位大神有没有遇见过这种问题啊？？ |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有135人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助毕赤酵母转化问题
已经有11人回复
- 大家做GS115毕赤酵母表达时流加甲醇是怎么灭菌的？
已经有16人回复
- 关于酵母抗zeocin时间问题
已经有9人回复
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
2楼2015-06-07 13:46:00
ggyy0911
铁虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1093.6
- 散金: 16
- 红花: 8
- 帖子: 510
- 在线: 148.2小时
- 虫号: 1888956
- 注册: 2012-07-11
- 性别: MM
- 专业: 临床兽医学
3楼2015-06-07 13:49:56
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2015-06-07 20:09:49
caichenggu
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 554.8
- 散金: 35
- 帖子: 228
- 在线: 154.2小时
- 虫号: 3081414
- 注册: 2014-03-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
5楼2015-06-08 12:55:58
caichenggu
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 554.8
- 散金: 35
- 帖子: 228
- 在线: 154.2小时
- 虫号: 3081414
- 注册: 2014-03-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
6楼2015-06-08 12:57:09
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
晞朔: MolEPI+1 2015-06-09 11:13:08
|
zeocin 100ug/ml对照组我试过很多次是可以不长空载的。索莱宝提供的说明书上写的很清楚，50ug/ml就可以把酵母菌筛掉了，所以Za说明书上的100ug/ml用来筛单拷贝是够用了的。 如果对照出现大量菌落。 1.抗生素的问题 如果买的是瓶装固体zeocin用的时候需要溶解分装，那配置的抗生素的终浓度够不够，向平板里加抗生素是否均匀，如果在倒平板前加抗生素，培养基的温度是否过高等，而且zeocin对光敏感，配好的zeocin需要避光保存，加好抗生素的平板也尽量避光的，不知道你用的是什么牌子的zeocin 2.涂板涂的过浓或者没涂开，配合以上问题就可能出现对照长菌，但是如果大量长菌，不排除你宿主菌本身就污染杂菌的可能。 [ 发自小木虫客户端 ] |
7楼2015-06-08 13:50:14
caichenggu
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 554.8
- 散金: 35
- 帖子: 228
- 在线: 154.2小时
- 虫号: 3081414
- 注册: 2014-03-23
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
8楼2015-06-08 16:27:12
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2015-06-08 16:53:33
投票:
10