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caichenggu铁虫 (小有名气)
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[求助]
毕赤酵母GS115表达，用博来霉素筛选对照和转化都长菌落是什么原因？已有2人参与
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| 我用毕赤酵母GS115表达蛋白，用化学转化法转化以后，转化和对照都长出了很多菌落，刚开始怀疑是抗生素的问题，现在换了新买的还是老样子，不知道问题出在哪里，各位大神有没有遇见过这种问题啊？？ |
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luwei13566
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【答案】应助回帖
晞朔: MolEPI+1 2015-06-09 11:13:08
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zeocin 100ug/ml对照组我试过很多次是可以不长空载的。索莱宝提供的说明书上写的很清楚，50ug/ml就可以把酵母菌筛掉了，所以Za说明书上的100ug/ml用来筛单拷贝是够用了的。 如果对照出现大量菌落。 1.抗生素的问题 如果买的是瓶装固体zeocin用的时候需要溶解分装，那配置的抗生素的终浓度够不够，向平板里加抗生素是否均匀，如果在倒平板前加抗生素，培养基的温度是否过高等，而且zeocin对光敏感，配好的zeocin需要避光保存，加好抗生素的平板也尽量避光的，不知道你用的是什么牌子的zeocin 2.涂板涂的过浓或者没涂开，配合以上问题就可能出现对照长菌，但是如果大量长菌，不排除你宿主菌本身就污染杂菌的可能。 [ 发自小木虫客户端 ] |
7楼2015-06-08 13:50:14
ggyy0911
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2楼2015-06-07 13:46:00
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3楼2015-06-07 13:49:56
luwei13566
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4楼2015-06-07 20:09:49