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zoemeig金虫 (小有名气)
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[求助]
MTT做不出来，麻烦大家帮我分析一下，先谢过啦~ 已有1人参与
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首先贴下我的实验步骤： 1. 细胞铺板：人肺纤维化细胞HLF，第8代细胞，96孔板中按每孔2000个细胞铺板（100ul），过夜贴壁； 2. 用含0.1% FBS的DMEM培养基饥饿处理24h； 3. 加药：按附件表格中的浓度加药（药物先溶于100ul步骤2中的培养基中再加入到96孔板中），其中第1、2孔不加，孵育30min； 4. PDGF-BB刺激：加药30min后，加20ng/ml PDGF-BB（1ug/ml, 4ul）刺激细胞增殖48h，其中第1孔不加； 5. 测MTT：48h后，加入20ul 5mg/ml MTT（PBS）溶液，孵育4h后，吸走培养基，加入100ul DMSO，振荡器振荡10min，检测在570nm处的吸光值。 结果是空白组的培养条件为含0.1% FBS的DMEM，培养3天后MTT检测值接近0.9，与加刺激组相近。 预计的结果应该是空白组很低，不知道这是为什么？ 总觉得是这株细胞的问题，似乎长太快了。 不知道有没有人做过相关的实验，或者养过人肺成纤维细胞，麻烦帮我看看这株细胞有没有什么问题呢？ 谢谢各位啦~  _5054228.JPG  _5114242.JPG  _5114243.JPG |
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