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半半911

新虫 (小有名气)

[求助] 扩增片段大小约5Kb的cDNA片段已有2人参与

本人最近实验要扩增一段约5Kb的cDNA(其中有1Kb左右GC含量比较高,约70%),试过各种酶都没有效果(La taq, La with GC buffer,  primer star, primer star GXL),请问有扩增 过这种片段的经验的怎么解决?或者帮忙推荐哪个公司可以提供扩增这种大片段的技术服务。谢谢!!!
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

一般的热启动酶 高保真酶就能很好的扩增了呀,,,你有1kbGC含量高,注意优化buffer,镁离子浓度进行摸索,此外,引物 模板你都确定是完美的吗?都要考虑好啊,毕竟是分子实验,多方面考虑
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
10楼2015-05-06 08:55:31
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