| 查看: 695 | 回复: 1 | |||
[交流]
转染TLR4检测双荧光素酶，细胞背景太高是和解？？
|
|
细胞293FT 质粒： TLR4100ng MD-2 100ng pBX-II luc NF-κB 50ng pRL-TK 0.5ng Invitrogen Lipo2000脂质体 转这4个质粒，转染6小时换液，然后等24小时用promega试剂盒裂解检测， 1.只转染两个荧光质粒的孔，背景比值0.5 2.转染TLR4+MD-2+两个荧光质粒，居然比值有44倍 3.转染TLR4+MD-2+两个荧光质粒，5ng/ml LPS刺激，居然还是44倍 说明转染TLR4/MD-2自己就已经在活化了？但是同批做的转染TLR2就没有问题，只有TLR4是这样子，这是什么问题？有没有战友碰到过？ 不同批次培养基，不同批次血清，不同批次提的去内毒素质粒，都试了，还是这样子？ 是去内毒素提质粒时去的不好，有残留吗？但是我6小时已经全换液了 还是有支原体污染细胞了？我们到是没有做过除支原体操作，但是貌似支原体不活化TLR4，只活化TLR2 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有140人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
2014年度浙江省自然科学基金拟资助项目清单
已经有14人回复
2楼2015-05-02 02:36:21