| 查看: 734 | 回复: 1 | |||
[交流]
转染TLR4检测双荧光素酶，细胞背景太高是和解？？
|
|
细胞293FT 质粒： TLR4100ng MD-2 100ng pBX-II luc NF-κB 50ng pRL-TK 0.5ng Invitrogen Lipo2000脂质体 转这4个质粒，转染6小时换液，然后等24小时用promega试剂盒裂解检测， 1.只转染两个荧光质粒的孔，背景比值0.5 2.转染TLR4+MD-2+两个荧光质粒，居然比值有44倍 3.转染TLR4+MD-2+两个荧光质粒，5ng/ml LPS刺激，居然还是44倍 说明转染TLR4/MD-2自己就已经在活化了？但是同批做的转染TLR2就没有问题，只有TLR4是这样子，这是什么问题？有没有战友碰到过？ 不同批次培养基，不同批次血清，不同批次提的去内毒素质粒，都试了，还是这样子？ 是去内毒素提质粒时去的不好，有残留吗？但是我6小时已经全换液了 还是有支原体污染细胞了？我们到是没有做过除支原体操作，但是貌似支原体不活化TLR4，只活化TLR2 |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有57人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 2014年度浙江省自然科学基金拟资助项目清单
已经有14人回复
2楼2015-05-02 02:36:21
