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chin_jl

铜虫 (小有名气)

[求助] 发酵液石油醚萃取旋蒸后质量都不一样,还有分段萃取的问题。 已有2人参与

小弟我在做微生物发酵液萃取方面的实验,经过萃取条件摸索,发现石油醚萃取效果比较好,能够萃取到发酵液里的抑菌活性物质,所以后面用石油醚进行小批量发酵萃取。
一共做了3次,第一次,2L发酵液,石油醚等体积萃取三次;第二次,发酵液5L,等体积萃取3次;第三次,发酵液2L,等体积萃取3 次。那么问题来了,这三次,石油醚相萃取结束以后,进行旋蒸,结果粗提物的质量并没有和发酵液体积成正比,
第一次得到粗提物1.44g;第二次得到粗提物230mg;第三次粗提物得到27mg,所以我现在很是蛋疼,而且第三次,粗提物石油醚溶解呈现天蓝色,而前面两次没有明显的颜色,而且每次粗体的抑菌活性也不一样,所以我很是蛋疼。
我之前在摸条件的时候,石油醚萃取后的粗提物抑菌活性非常好,所以进行下面的小批量发酵往下面摸条件,但是现在这三次,在萃取这里就没有很好的重现性,所以我现在很是凌乱,不知道该怎么办了。
不知道有没有学长学姐前辈们知道这是为什么,能不能给点指点,帮忙分析以下。
再就是,我要不要继续做分段萃取,我之前是用石油醚,氯仿,乙酸乙酯,正丁醇摸索的萃取条件,之前是石油醚效果好,现在要不要继续分段萃取呢 ?那样是不是很浪费试剂啊,我意思是就是用这四种试剂对发酵液依次等体积萃取三遍,然后看看每一部分的抑菌活性如何,这么做可行吗?这次做的发酵液还有,就是用石油醚萃取完的发酵液,希望大家能来指点以下。谢谢
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chin_jl

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by czzlnkar at 2015-04-22 13:18:15
可能会有乳化,石油醚和水互溶程度极低
我不太懂发酵的问题,不过有影响估计有的,没问题还要中试做什么...

我现在真的只能认为是季节不一样,微生物次级代谢产物不一样吧。。。。哎。。。感觉回到解放前了,,目测得从头开始了
8楼2015-04-22 21:14:16
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czzlnkar

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
chin_jl: 金币+5 2015-04-22 10:31:04
具体发生什么问题光这么看不知道,除非你操作出现问题,另外还有个问题,你那2L,5L,2L发酵液是依次取的还是分次发酵的,可能重复性本身不好,如果是一罐子里依次取的则也有可能你没混匀就取了
2楼2015-04-22 08:49:17
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chin_jl

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czzlnkar at 2015-04-22 08:49:17
具体发生什么问题光这么看不知道,除非你操作出现问题,另外还有个问题,你那2L,5L,2L发酵液是依次取的还是分次发酵的,可能重复性本身不好,如果是一罐子里依次取的则也有可能你没混匀就取了

具体操作都是一样的,就是发酵完了,我是200ml每次萃取的,操作一直都是一样的,但是每次重现性都不一致。。。所以,我也很郁闷。。不知道为什么
3楼2015-04-22 10:30:57
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chin_jl

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czzlnkar at 2015-04-22 08:49:17
具体发生什么问题光这么看不知道,除非你操作出现问题,另外还有个问题,你那2L,5L,2L发酵液是依次取的还是分次发酵的,可能重复性本身不好,如果是一罐子里依次取的则也有可能你没混匀就取了

之前摸条件是依次萃取的
4楼2015-04-22 10:31:41
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