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晨霭微凉金虫 (小有名气)
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液相检测一个新化合物，流动相加酸和不加酸结果完全不一样，请问是什么原因？ 已有3人参与
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该化合物为磷酸盐 液相条件：60：40（甲醇：水），C18色谱柱，流速0.8，发现拖尾很严重，就在流动相加入0.5%乙酸，其他条件一样。结果出峰时间完全不一样。请问原因是什么，是跟该化合物为磷酸盐有关么？这样检测这个化合物可行么？  `流动相不加酸  流动相加酸 |
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你自己也说了，这是一个磷酸化合物，反相分离方法开发，要注意控制待测物的离子形态，磷酸类化合物会存在分子型和离子型，就是磷酸的解离。如果不控制，则两种形态都有(也可能不是两种形态，磷酸有三价）。会出现几种形态的色谱峰，双峰的，马鞍峰的，或者是你这种大宽峰的，这取决于不同形态之间转化的速度。具体请参考分析化学滴定那章。简言之，做反相HPLC分离，开发方法要注意流动相pH要么比待测物pKa大2个单位，或者小2个单位。所以你不应该加乙酸，应该配置流动相含有0.1%TFA比较合适 [ 发自小木虫客户端 ] |
4楼2015-04-07 20:32:27
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