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谢晨曦

金虫 (小有名气)

[求助] WB hrp 显色结果很奇怪为什么

WB hrp 显色结果很奇怪为什么
第三张图： 同一张胶上做的  剪开来，扎，不同抗体，ACTIN很奇怪如图所示，下面30KD的扎FLAG很正常
第四张图：另外一张胶也是这种情况，为什么
第一张是扎110KD蛋白
第二张是扎40kd 蛋白，每个泳道的带，都不好看，
总的来说，我每次显色的带，总是弯弯曲曲的。我是用10%的胶，0.2pvdf膜，湿转 2个半小时 10孔，上样20ul
跑胶的时候，溴酚蓝的带也压的不齐，以前怀疑是用水封的原因，前三张图，我都是用异丙醇封的，然后用水洗6，7遍

WB hrp 显色结果很奇怪为什么
w418h1709581_1427548349_125.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-1
w383h1709581_1427547818_474.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-2
w418h1709581_1427548349_125.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-3
w482h1709581_1427547817_291.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-4
w574h1709581_1427547817_733.png
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1楼 2015-03-30 16:00:48
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shishen234

新虫 (初入文坛)
感觉第二张是不是因为跑胶或者转膜的时候散热不好，产热太高了，条带才飘的。。。我也是新手，也刚发了求助帖，帮你顶顶吧~
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2楼2015-03-30 16:07:46
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谢晨曦

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shishen234 at 2015-03-30 16:07:46
感觉第二张是不是因为跑胶或者转膜的时候散热不好，产热太高了，条带才飘的。。。我也是新手，也刚发了求助帖，帮你顶顶吧~

谢谢啊，但我是一起做的
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3楼2015-03-30 21:16:20
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DIANDIAN12

铜虫 (初入文坛)
我刚开始做WB的时候条带也不好看，后来做多了慢慢就好看了。有过像你第一张图那样条带一头粗一头细的情况，是因为插梳子的时候慢了，或者不稳。图二三四那样的没遇到过，也不知道是怎么回事。
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4楼2015-05-03 11:37:13
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