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谢晨曦

金虫 (小有名气)

[求助] WB hrp 显色结果很奇怪为什么

WB hrp 显色结果很奇怪为什么
第三张图: 同一张胶上做的  剪开来,扎,不同抗体,ACTIN很奇怪如图所示,下面30KD的扎FLAG很正常
第四张图:另外一张胶也是这种情况,为什么
第一张是扎110KD蛋白
第二张是扎40kd 蛋白,每个泳道的带,都不好看,
总的来说,我每次显色的带,总是弯弯曲曲的。我是用10%的胶,0.2pvdf膜,湿转 2个半小时 10孔,上样20ul
跑胶的时候,溴酚蓝的带也压的不齐,以前怀疑是用水封的原因,前三张图,我都是用异丙醇封的,然后用水洗6,7遍

WB hrp 显色结果很奇怪为什么
w418h1709581_1427548349_125.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-1
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WB hrp 显色结果很奇怪为什么-2
w418h1709581_1427548349_125.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-3
w482h1709581_1427547817_291.png


WB hrp 显色结果很奇怪为什么-4
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shishen234

新虫 (初入文坛)

感觉第二张是不是因为跑胶或者转膜的时候散热不好,产热太高了,条带才飘的。。。我也是新手,也刚发了求助帖,帮你顶顶吧~
2楼2015-03-30 16:07:46
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谢晨曦

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shishen234 at 2015-03-30 16:07:46
感觉第二张是不是因为跑胶或者转膜的时候散热不好,产热太高了,条带才飘的。。。我也是新手,也刚发了求助帖,帮你顶顶吧~

谢谢啊,但我是一起做的
3楼2015-03-30 21:16:20
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DIANDIAN12

铜虫 (初入文坛)

我刚开始做WB的时候条带也不好看,后来做多了慢慢就好看了。有过像你第一张图那样条带一头粗一头细的情况,是因为插梳子的时候慢了,或者不稳。图二三四那样的没遇到过,也不知道是怎么回事。
4楼2015-05-03 11:37:13
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