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求助凝胶过滤层析装柱问题
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stirith
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专业: 生物化工与食品化工
[
求助
]
求助凝胶过滤层析装柱问题
已有2人参与
手动装了三次凝胶柱,装柱操作如下:填料为Sephacryl S100 亚甲基双丙烯酰胺交联葡聚糖,玻璃柱直径1.5cm,长度95cm,先加入1/3体积洗脱液,再加入凝胶匀浆,待沉积5cm左右时打开柱出口,以蠕动泵控制约0.2ml/min的流速,沉积完毕后用缓冲液以1ml/min流速平衡2个柱体积。
目前出现的问题是,改变压力开始平衡的时候,底部的凝胶就出现裂缝,但是装柱的过程没有见到气泡,凝胶表面始终有缓冲液流过,也不像是胶体干了造成的,不知道有没有人遇到类似的现象?是怎么解决的?
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1楼
2015-03-16 14:25:55
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银虫
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专业: 细胞衰老
缓冲液是不是易挥发的东西?
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4楼
2015-04-17 10:24:40
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xulin0417
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【答案】应助回帖
要么密封性不好,要么流速低了。你的线性流速太低了吧!
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2楼
2015-04-10 14:10:03
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stirith
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专业: 生物化工与食品化工
流速不算低了,之前实验室别的同学0.5ml/min跑的,效果还可以,谢谢回复
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3楼
2015-04-11 09:55:49
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【答案】应助回帖
密闭性不好。祝顺利。
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5楼
2015-08-28 16:41:08
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