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zch4273

银虫 (初入文坛)

[求助] 如何提高同源重组敲除基因过程中同源臂的双链断裂概率 已有1人参与

在利用同源重组的方法对基因进行整合敲除的过程中,是要基因组同源臂片断处产生断裂才能引发DNA修复机制,从而对靶基因进行敲除,此时形成双链断裂是随机的呢还是针对不同的dna碱基序列概率不一样,在设计同源臂的时候要进行有目的性的选择,同源臂中存在酶切位点会提高双链断裂的概率吗?有或者有别的提高同源重组敲除基因过程中同源臂的双链断裂概率的方法,望虫友们能不吝解惑~~~
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
基因打靶时,引入I-sceI酶切位点,可以增强双链断裂几率
2楼2015-03-05 10:24:05
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zch4273

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liygmail at 2015-03-05 10:24:05
基因打靶时,引入I-sceI酶切位点,可以增强双链断裂几率

感谢交流,我的实验是整合敲除酵母基因,采用同源臂同源重组的方法,这个方法好像不行吧。有别的方式或者规律吗?
3楼2015-03-06 17:26:54
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