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purelove2003

铁虫 (初入文坛)

[求助] β-内酰胺类抗生素聚合物检测波长选择 已有3人参与

想请教一下各位老师,β-内酰胺类抗生素聚合物检测时该如何选择检测波长?目前遇到一个品种,在测定聚合物时(采用TSK G2000 Swxl,pH7.0磷酸盐体系),各检测波长下聚合物的大小差异较大,查询了一些文献,包括药典上的抗生素品种,一般选择254nm波长,也有选择最大吸收波长的,例如231nm、267nm,但该品种在最大吸收波长下的测定结果较小,比其他波长下小了0.8%左右,这种情况下该如何选择检测波长呢?希望各位老师能给点建议,谢谢!
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by purelove2003 at 2015-02-26 17:41:33
谢谢老师,因为目前用的检测方法检出来的聚合物可能是二聚体、三聚体甚至四聚体,比主峰洗脱早的峰都算作是聚合物,可能会有好几个色谱峰。而且如果用面积归一化不同波长检测结果差异大的话,用外标法来计算,结果 ...

想用外标法,你去试试制备对照品并标定。
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
8楼2015-02-26 21:53:46
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deayuka

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
检测器的波长应该不会影响柱子本身的分离啊。
比较怀疑是待测物不纯引起的问题,波长变化造成物质响应值的变化导致看起来像是出峰位置变了。
2楼2015-02-26 13:06:51
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kf1009

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
purelove2003: 金币+2, 有帮助, 谢谢! 2015-02-26 17:32:27
如果凝胶色谱分离出来的是聚合物,他与主成分的吸收应该相似,哪个波长结果都应该差不多。实际上N个β-内酰胺类抗生素聚合物检测中分离出来的不全是聚合物(我把好几个品种分离出来的组分上了LC-MASS),更多是开环物或其他降解杂质,β-内酰胺类抗生素开环后紫外吸收降低,低波长检测应该会大很多。凝胶色谱质控聚合物,真心不靠谱,你看EP、USP收载那么多β-内酰胺类抗生素,有没有用凝胶色谱来控制聚合物的?
快乐不需要走遍天涯去寻找,只需播一粒种子在脚下。
3楼2015-02-26 16:55:27
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456895

禁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
purelove2003: 金币+2, 有帮助, 谢谢! 2015-02-26 17:33:07
本帖内容被屏蔽

4楼2015-02-26 17:21:16
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