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【求助】蛋白含量测定
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请问： 用考马斯亮蓝法测商品酶的蛋白含量，结果不显色，吸光度为0，有谁知道请指教，谢谢。 [ Last edited by yusen_1982 on 2009-3-24 at 22:01 ] |
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heavence007(金币+1,VIP+0):谢谢分享答案
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):回答很精彩，再奖，生物材料版期待您更多的参与！ 5-25 14:53
heavence007(金币+1,VIP+0):谢谢分享答案
薰衣草儿(金币+1,VIP+0):回答很精彩，再奖，生物材料版期待您更多的参与！ 5-25 14:53
| 可以先检查一下试剂或仪器有没有问题了。操作如果也没失误的话应该不会有什么问题的。考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。该法是1976年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高4倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg／mL，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。 |
3楼2008-06-11 13:49:12
4楼2008-06-11 19:41:00