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kassymi

新虫 (初入文坛)

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[求助] 请问western blot跑出的蛋白分子量跟说明书的差10kd以上怎么回事？已有2人参与

我的蛋白非成熟的和完全成熟的应该是165kd和175kd，但是我跑出来在190kd和130kd，而且基本没有杂带，主带又很清晰，这是为什么啊？？白高兴了我还以为我终于跑出来了。师姐说这种不是我的目的蛋白。

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【求助】急！有木有做过Tricine－SDS－PAGE小分子蛋白电泳的进！已经有32人回复

1楼 2015-02-04 15:39:12

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kassymi

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引用回帖:

3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-02-06 12:41:41
190kDa和175kDa差别不是很大，高分子量的marker普遍不太准的
130kDa确实差得有些多，有时候蛋白含酸性氨基酸比较多，或者post translational modification会和正常的条带位置不一样

谢谢谢谢！我就当190kd的那个条带是了，130kd那个先不管？您觉得我有必要换个别的牌子的marker吗？我现在用的fermantas那个大家最常用的。170kd以上就没marker了。