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卢家彬木虫 (小有名气)
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[交流]
请教DEAE-FF CM-FF挂不住蛋白
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生菌胞内酶-细胞破碎后-硫酸铵沉淀-透析除盐-超滤浓缩-平衡液为20mM Tris-HCL pH8.0 ,NaCl浓度分别为0.1M,0.3M,0.5M,1M Tris-HCl 分步洗脱,检测酶活全部在穿透峰里面,小的洗脱峰没有酶活,柱子DEAE-FF。 又用50mM磷酸缓冲液为平衡液,pH6.0,NaCl浓度分别为0.1M,0.3M,0.5M,1M 磷酸缓冲液分步洗脱,酶活检测全部在穿透峰,洗脱峰就一个小的峰。请问这是怎么回事,全是自己摸索,不知道问题出在哪里,还请高人指点 |
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