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卢家彬(金币+2): 谢谢参与
顶一下!
41楼2015-01-20 15:29:54
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江漓湄best

金虫 (小有名气)


卢家彬(金币+2): 谢谢参与
送红花一朵
加油加油加油

[ 发自小木虫客户端 ]
42楼2015-01-20 15:30:56
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卢家彬(金币+2): 谢谢参与
祝福祝福
43楼2015-01-20 15:31:43
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44楼2015-01-20 15:50:46
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卢家彬

木虫 (小有名气)

无语了
45楼2015-01-20 21:19:11
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baodongq

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

46楼2015-01-21 14:22:05
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卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
46楼: Originally posted by baodongq at 2015-01-21 14:22:05
楼主问题得到解决了吗?看了你的描述觉得问题很明显。
首先DEAE-FF是弱阴离子交换树脂,你的体系pH8.0可能太低了,可以换成更高pH9.0或10.0的缓冲体系试试。
反而CM-FF是阳离子交换树脂,你向让他结合的话那要让蛋 ...

ph太高,或太低的话,目的蛋白可能会失活吧,没有试

[ 发自小木虫客户端 ]
47楼2015-01-21 17:32:00
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lxgnh166

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你的蛋白等电点多少,你的DEAE FF PH条件太低了,你把PH调高但是最好高于等电点一个单位,且不出现沉淀,PH 6到9都可以试下。
48楼2015-01-30 09:01:16
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贾昕

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
先调pH值,再调洗脱液浓度,做静态梯度实验,找到洗脱条件(pH,浓度),然后进行正式洗脱(当年多么痛的领悟)。
49楼2015-02-03 16:44:08
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卢家彬

木虫 (小有名气)

引用回帖:
48楼: Originally posted by lxgnh166 at 2015-01-30 09:01:16
你的蛋白等电点多少,你的DEAE FF PH条件太低了,你把PH调高但是最好高于等电点一个单位,且不出现沉淀,PH 6到9都可以试下。

野生菌  ,不知道等电点,最近我用10mMTris-HCl(pH=8.0)平衡,目的蛋白挂上去了,不过用0.01M的盐浓度就把目的蛋白洗脱下来了,很不稳定,有时在平衡液里也有酶活。这怎么破
50楼2015-02-04 11:43:08
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