24小时热门版块排行榜    

查看: 1177  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xiaomeng12

银虫 (正式写手)

[求助] 微量紫外分光光度计

前段日子实验室买了微量紫外分光光度计,发现比色皿模式与微量模式测出来的DNA浓度与OD值相差很大,请问是什么原因啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomeng12

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-01-19 09:28:23
检查一下pathlength是不是一样

比方说用比色皿测OD值在1.53,浓度为70ng/ul,但是用微量模式OD值在3.01,浓度为300ng/ul,请问应该相信哪个数值啊?
3楼2015-01-21 19:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaomeng12: 金币+10, 有帮助 2015-01-21 19:18:24
检查一下pathlength是不是一样
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2015-01-19 09:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-22 16:44:36
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaomeng12 at 2015-01-20 23:18:14
比方说用比色皿测OD值在1.53,浓度为70ng/ul,但是用微量模式OD值在3.01,浓度为300ng/ul,请问应该相信哪个数值啊?...

对于1 cm的光程,双链DNA浓度=OD260*50  比色皿大多都是1cm光程,所以1.5对应70ng/ul差不多
微量模式我只能假设你那个光程是0.5 cm所以算出来的浓度是300
至于两个数字应该相信哪一个,只凭这些信息也没法判断, 反正肯定有一个是错的没跑了
常见的产生差异的可能原因:
1. 比色皿或者测量的容器本身有吸收,比如你用聚苯乙烯塑料做的比色皿或96孔板而不是石英的话,这些塑料就在OD260有吸收
2. 背景没有做校正
3. 测量的值饱和了,不在线性区间内,这个你就要自己翻一翻说明书或者做个标准曲线看一看

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-01-22 10:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomeng12

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-01-22 10:23:20
对于1 cm的光程,双链DNA浓度=OD260*50  比色皿大多都是1cm光程,所以1.5对应70ng/ul差不多
微量模式我只能假设你那个光程是0.5 cm所以算出来的浓度是300
至于两个数字应该相信哪一个,只凭这些信息也没法判断,  ...

你分析地很有道理,的确是超出线性范围了,问了厂家他们说这个比色皿最大能测量的值是70ng
但是按照微量模式测定的数值OD260/280和260/230均在3点多,是否代表提取的DNA降解或者有RNA污染,如果以这个数值提取出来的DNA为模版进行几个20kb大小基因的PCR,还能P的出来嘛?
5楼2015-01-22 22:23:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +4 Tide man 2026-08-11 4/200 2026-08-12 00:39 by liuqidi
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +17 Lanmanbaby 2026-08-09 29/1450 2026-08-12 00:24 by zhanghaozhu
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见