应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » ProteinL 纯化mouse IgG1，PH2.0洗脱下来很少，有什么方法提高？
51/1返回列表
查看: 1205  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yakir

银虫 (小有名气)

[求助] ProteinL 纯化mouse IgG1，PH2.0洗脱下来很少，有什么方法提高？

杂交瘤表达的mouse IgG1 ，kappa轻链的，因为里面有血清，所以选用Protein L，结合良好，但洗脱的时候发现洗脱不理想，用了100mM Glycine，150mMNaCl，PH3.5，PH3.0，PH2.5，PH2.0分别洗脱，就PH2.0能洗脱下来小部分。还有什么其他的方法能提高吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
一步一步！
1楼 2015-01-15 10:10:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yakir

银虫 (小有名气)
自己顶下。
昨天尝试了分别在PH2.0洗脱液中加入了0.5M NaCl，1M NaCl，2M NaCl，还是没有帮助。
尝试了ProteinG，同样的问题PH2.0只能洗脱下来少量，同时也尝试了PH2.0洗脱液中加入了0.5M NaCl，1M NaCl，2M NaCl，没有帮助哦。
看来只能尝试在培养上清中加入0.5-3M NaCl ，然后用ProteinA来试试看了，先捕获了再考虑去除牛的IgG吧，下周再尝试，期待结果。
赞一下 回复此楼
一步一步！
2楼2015-01-16 10:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lijing1212

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
3楼2015-01-20 14:45:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yakir

银虫 (小有名气)
经过试验得到结果：培养上清加入0.5M NaCl能够结合proteinA ，PH3.0能够洗脱下来。然后PH7.0的buffer过Q HP，牛IgG在流出液中，mouse IgG用300mM NaCl洗脱能够等到。
赞一下 回复此楼
一步一步！
4楼2015-01-30 17:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yakir

银虫 (小有名气)
只是用了两步，稍微麻烦点。。。
赞一下 回复此楼
一步一步！
5楼2015-01-30 17:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yakir 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 面上合作单位盖章 +3 ssyjh 2026-08-27 3/150 2026-08-27 09:59 by 阿拉贡aragon
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭