应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 半定量pcr一直做不出，很痛苦！
52/1返回列表
查看: 3514  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

押沙龙1989

新虫 (小有名气)

[求助] 半定量pcr一直做不出，很痛苦！ 已有6人参与

大家好！我最近在做一植物里面热激转录因子的半定量，一直不稳定，目的基因和内参都是有时扩得出有时扩不出，甚至同一管cDNA也出现这种情况，引物换了，酶也换了，情况还是那样，搞了两三个月一点进展都没有。
        我现在研二，因为是刚接触分子实验老师就让我做半定量，这边也没有师兄师姐可以请教，有时遇到一些问题都很难解决，所以现在心情很是压抑，望各位前辈能给予指导！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
牵牛花呀，一朵深渊色。
1楼 2015-01-12 17:19:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by crescent010 at 2015-05-11 16:08:50
大神你还在做热激转录因子么？能问下你有没有克隆热激转录因子基因么？我有些问题想请教一下
你的转录因子是从转录组中找的么？orf是否完整？

熱激轉錄因子 HSF家族的嗎？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
18楼2015-05-11 22:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-15 18:37:22
RNA、cDNA的质量如何？内参基因都扩不出来吗？先用内参确定你的模板能用。
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-12 17:57:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

押沙龙1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 17:57:13
RNA、cDNA的质量如何？内参基因都扩不出来吗？先用内参确定你的模板能用。

RNA应该还可以，问了一下别人，也说内参应该扩得出。同一管cDNA内参有时扩得出有时扩不出，总是不稳定。我这边pcr仪挂壁比较严重，P完后25ul有10多ul挂在壁上，这个影响大么？
赞一下 回复此楼
牵牛花呀，一朵深渊色。
3楼2015-01-12 21:44:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 押沙龙1989 at 2015-01-12 21:44:58
RNA应该还可以，问了一下别人，也说内参应该扩得出。同一管cDNA内参有时扩得出有时扩不出，总是不稳定。我这边pcr仪挂壁比较严重，P完后25ul有10多ul挂在壁上，这个影响大么？...

P之前离心一下，不行，换一台PCR仪试试
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-12 21:48:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:17 by hZiFeudZyoGR
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:07 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 9/450 2026-08-30 17:56 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 17:36 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 12/600 2026-08-30 17:11 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 面上意见出来了 +9 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 18/900 2026-08-30 16:47 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +4 echo8914667 2026-08-30 4/200 2026-08-30 16:03 by sundiv
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +6 德尚中行 2026-08-27 7/350 2026-08-30 12:53 by Bxndjjd
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭