应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 半定量pcr一直做不出，很痛苦！
51/1返回列表
查看: 3508  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

押沙龙1989

新虫 (小有名气)

[求助] 半定量pcr一直做不出，很痛苦！ 已有6人参与

大家好！我最近在做一植物里面热激转录因子的半定量，一直不稳定，目的基因和内参都是有时扩得出有时扩不出，甚至同一管cDNA也出现这种情况，引物换了，酶也换了，情况还是那样，搞了两三个月一点进展都没有。
        我现在研二，因为是刚接触分子实验老师就让我做半定量，这边也没有师兄师姐可以请教，有时遇到一些问题都很难解决，所以现在心情很是压抑，望各位前辈能给予指导！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
牵牛花呀，一朵深渊色。
1楼 2015-01-12 17:19:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

押沙龙1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 17:57:13
RNA、cDNA的质量如何？内参基因都扩不出来吗？先用内参确定你的模板能用。

RNA应该还可以，问了一下别人，也说内参应该扩得出。同一管cDNA内参有时扩得出有时扩不出，总是不稳定。我这边pcr仪挂壁比较严重，P完后25ul有10多ul挂在壁上，这个影响大么？
赞一下 回复此楼
牵牛花呀，一朵深渊色。
3楼2015-01-12 21:44:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-15 18:37:22
RNA、cDNA的质量如何？内参基因都扩不出来吗？先用内参确定你的模板能用。
赞一下 回复此楼
2楼2015-01-12 17:57:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 押沙龙1989 at 2015-01-12 21:44:58
RNA应该还可以，问了一下别人，也说内参应该扩得出。同一管cDNA内参有时扩得出有时扩不出，总是不稳定。我这边pcr仪挂壁比较严重，P完后25ul有10多ul挂在壁上，这个影响大么？...

P之前离心一下，不行，换一台PCR仪试试
赞一下 回复此楼
4楼2015-01-12 21:48:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

押沙龙1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-01-12 21:48:42
P之前离心一下，不行，换一台PCR仪试试...

恩，我们这边条件比较差，老师也是让我提了RNA之后在别的实验室去做，多谢前辈了！
赞一下 回复此楼
牵牛花呀，一朵深渊色。
5楼2015-01-12 21:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 06:43 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 06:22 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 06:02 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 13/650 2026-08-30 05:38 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 01:36 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭