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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 如何分离相差12bp的DNA片段 急急急！
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hj2013china

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何分离相差12bp的DNA片段 急急急！ 已有11人参与

怎么分离相差12bp的DNA片段，求助高手
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1楼 2015-01-06 17:32:17
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

titus0805

铁虫 (小有名气)

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hj2013china(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:09:13
跑聚丙烯酰胺的胶，很容易分出来。有专门回收聚丙烯酰胺胶的试剂盒。
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5楼2015-01-07 11:17:46
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781055707

木虫 (著名写手)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:09:03
你看看两条片段上的不同酶切位点，用内切酶把一条切断，剩下的90%里就都是另一条了。                                          或者跑PCR，连T载体，在筛。
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采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-01-07 10:11:07
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oO晶锅Oo

银虫 (初入文坛)

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hj2013china(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:09:20
我做过60 nt+12 nt的琼脂糖电泳，用4%琼脂糖电泳，40分钟，电压80 V以下，不用变性，不会弥散，看位置差异没有问题，胶回收没做。不知道你的目的片段是多少bp？告诉我可以继续回复你。
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9楼2015-01-07 16:31:05
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

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hj2013china(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:09:29
你跑2%的胶，然后多跑点时间2h，低电压
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2楼2015-01-06 18:02:33
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
这个真的不好搞
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3楼2015-01-07 09:43:52
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titus0805

铁虫 (小有名气)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:09:41
就一般做ssr的小板就可以，很多ssr都是差距在10几个bp的
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6楼2015-01-07 11:20:40
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

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hj2013china(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:09:49
聚丙烯酰胺尿素胶足够区分，但是双链DNA的两条链也会分开，你切胶回收以后要重新把两条链混合在一起
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2015-01-07 12:41:51
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titus0805

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-01-07 12:41:51
聚丙烯酰胺尿素胶足够区分，但是双链DNA的两条链也会分开，你切胶回收以后要重新把两条链混合在一起

变性对page胶分辨率没有什么影响吧，除非是结构复杂的长链DNA。用非变性的应该就行了。
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8楼2015-01-07 12:51:57
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daniel1112

金虫 (小有名气)

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hj2013china(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-08 12:10:00
一般的琼脂糖胶不行，经济允许的话可以使用bio-red分离10～200bp的琼脂糖，有些贵，好像是580多美元100克。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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10楼2015-01-07 23:44:27
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