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answer.

铜虫 (初入文坛)

[求助] 总黄酮含量测定中遇到的问题(芦丁作为对照品) 已有3人参与

大家好,小弟在做一个保健品的课题(用的标准是“仓公敖“老师的)做了几次用紫外可见分光光度计(200nm-800nm全波长扫描),以芦丁为对照品测定黄酮含量的试验,标准上说的是在510nm左右有最大吸收波长。
准确吸取定量样品溶液,加入30%乙醇液至5mL,各加5%亚硝酸钠溶液0.3mL,振摇后放置5min,加入10%硝酸铝溶液0.3mL,摇匀后放置60min,加1.0mol/L氢氧化钠溶液2mL,用30%乙醇定容至刻度,以零管为空白,摇匀后用1cm的比色皿,在510nm处测定吸光度。
   标准曲线的制定是量取芦丁对照品0ml、0.5ml、1ml.2ml,3ml,4ml.用得是移液管。芦丁0.1502μg/ml用的是75%乙醇。用甲醇做的空白。
    测得的芦丁的吸光度分别是0、507、501、498、493、486(纳米)而样品的是470、465纳米;没有在给定的510纳米。
请问一下是什么原因,望各位师兄师姐师弟师妹知道的解答一下为谢。
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justdoit.
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986449958

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by answer. at 2014-12-26 21:04:05
是二氢黄酮类有效成分,但是保健品的要求含测黄酮类就是用芦丁作为对照品,要是不用芦丁的话用什么好呢...

可以用槲皮素吗?我记得在那篇文献看过。
4楼2015-01-07 22:22:53
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恋风春雪

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
明显你的对照选择不合理,测量总黄酮不一定选择芦丁,要看你的样品里的黄酮大概都是什么类型的,在选择适宜的对照品
2楼2014-12-24 10:20:15
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answer.

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 恋风春雪 at 2014-12-24 10:20:15
明显你的对照选择不合理,测量总黄酮不一定选择芦丁,要看你的样品里的黄酮大概都是什么类型的,在选择适宜的对照品

是二氢黄酮类有效成分,但是保健品的要求含测黄酮类就是用芦丁作为对照品,要是不用芦丁的话用什么好呢
justdoit.
3楼2014-12-26 21:04:05
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海豚彦彦

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

不同种类的黄酮,因为结构不同,此显色法下的得到的产物颜色不一样。芦丁显红色,而你的样品可能黄色-橙色-橙红色之间,建议你用二氢杨梅素做定量的对照品,比较合适。
5楼2015-04-15 16:04:36
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