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猫猫猫小丫

铜虫 (初入文坛)

[求助] 总黄酮的测定出问题了已有4人参与

测定总黄酮,用NaNO2---Al(NO3)3---NaOH法显色,UV测定。含量超过100%。请问是哪个方面出了问题?另外,换成AlCl3显色方法和KOH显色方法,芦丁最大吸收峰波长和样品最大吸收峰相差25nm以内。这样可以选择这两种方法测定总黄酮么?十分着急,拜托各位大侠了!
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踏雪2012

木虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-24 20:10:26
首先你要知道自己测定物质中总黄酮的大致含量,UV法测定的弊端就是专属性差,在你选定的波长处有其他的物质也有吸收,导致含量超过正常值。总黄酮本身就有紫外的吸收,也可以不用显色吧
往事随风
2楼2014-10-23 08:06:38
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jytryh

木虫 (正式写手)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-24 20:10:31
含量超100%除非样品的纯度超对照品,你的对照品是自己提的还是买的?即使样品中有其他黄酮也不可能出现这种情况,可能是你的波长选择问题,你可以选择芦丁的最大吸收峰波长试试,也有可能是操作误差,容量瓶误差,或者样品的羟基比芦丁多显色更容易
中医药是中华民族一颗璀璨的明珠
3楼2014-10-23 08:44:50
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fishlone

金虫 (著名写手)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-24 20:10:36
首先你要知道自己测定物质中总黄酮的大致含量,UV法测定的弊端就是专属性差,在你选定的波长处有其他的物质也有吸收,导致含量超过正常值。总黄酮本身就有紫外的吸收,也可以不用显色吧
4楼2014-10-23 09:18:35
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猫猫猫小丫

铜虫 (初入文坛)

有文献报道,没纯化的22%左右,纯化后68%。我没纯化之前是18%纯化以后就超过百分之百了。我看的文献都是要显色的。我也不太明白。除了,UV还可以用其他什么方法测总黄酮含量?另外,波长相差20nm测含量行不行?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-10-23 15:48:07
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lily19861202

银虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-10-24 20:10:41
总黄酮本身就是一个粗略的检测方法,含量超过100%也属正常情况,在粗略方法上纠结没什么意义。你只有往后更细分,才更有价值。紫外直接测定也是比较好的方法,和显色之后的结果进行对比,你更有数啊。
6楼2014-10-24 10:04:43
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JIANGFUYU98

木虫 (小有名气)

建议好好检查一下计算公式是不是那地方错了。
主动提高,主动迎接挑战,随时准备调整,有理性依据。
7楼2014-10-25 08:43:44
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