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yangyangxfl

新虫 (初入文坛)

[求助] 2000多bp lncRNA扩增全长基因

各位大神,我想扩增一段2000多bp的lncRNA,前引物Tm61°C,后引物60°C,我用54到64的退火梯度没扩出来,但是cDNA能扩出内参。再次改条件,用基因组DNA扩,PCR程序是95°C, 5min;95°C, 30s,  58 °C, 30s,72°C  2min,30个循环;72°C,7min,也没扩出来。酶用的是2*Taq PCR Master Mix。请各位指点下啊  ,是酶的问题?引物还是lncRNA本身扩全长基因不好扩?谢谢啦
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yangyangxfl

新虫 (初入文坛)

求教啊
2楼2014-12-22 23:04:48
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cloveseven

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yangyangxfl at 2014-12-22 23:04:48
求教啊

楼主,我现在也遇到了同样的问题,请问你现在这个问题解决了没?向你请教一下
3楼2016-01-26 16:31:02
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machao8405

木虫 (正式写手)

反转录用的oligodt 还是随机引物?
4楼2016-01-30 21:31:04
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