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2000多bp lncRNA扩增全长基因
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| 各位大神,我想扩增一段2000多bp的lncRNA,前引物Tm61°C,后引物60°C,我用54到64的退火梯度没扩出来,但是cDNA能扩出内参。再次改条件,用基因组DNA扩,PCR程序是95°C, 5min;95°C, 30s, 58 °C, 30s,72°C 2min,30个循环;72°C,7min,也没扩出来。酶用的是2*Taq PCR Master Mix。请各位指点下啊 ,是酶的问题?引物还是lncRNA本身扩全长基因不好扩?谢谢啦 |
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2楼2014-12-22 23:04:48
cloveseven
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