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2000多bp lncRNA扩增全长基因
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| 各位大神，我想扩增一段2000多bp的lncRNA，前引物Tm61°C，后引物60°C，我用54到64的退火梯度没扩出来，但是cDNA能扩出内参。再次改条件，用基因组DNA扩，PCR程序是95°C, 5min；95°C， 30s， 58 °C, 30s，72°C 2min，30个循环；72°C，7min，也没扩出来。酶用的是2*Taq PCR Master Mix。请各位指点下啊 ，是酶的问题？引物还是lncRNA本身扩全长基因不好扩？谢谢啦 |
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