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2000多bp lncRNA扩增全长基因
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yangyangxfl
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2000多bp lncRNA扩增全长基因
各位大神,我想扩增一段2000多bp的lncRNA,前引物Tm61°C,后引物60°C,我用54到64的退火梯度没扩出来,但是cDNA能扩出内参。再次改条件,用基因组DNA扩,PCR程序是95°C, 5min;95°C, 30s, 58 °C, 30s,72°C 2min,30个循环;72°C,7min,也没扩出来。酶用的是2*Taq PCR Master Mix。请各位指点下啊 ,是酶的问题?引物还是lncRNA本身扩全长基因不好扩?谢谢啦
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想扩A基因的启动子序列,A基因上游2000bp包含了B基因,有什么影响吗?
已经有4人回复
1楼
2014-12-18 16:43:28
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yangyangxfl
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专业: 生物
求教啊
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2014-12-22 23:04:48
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专业: 生物大分子结构与功能
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2楼
:
Originally posted by
yangyangxfl
at 2014-12-22 23:04:48
求教啊
楼主,我现在也遇到了同样的问题,请问你现在这个问题解决了没?向你请教一下
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3楼
2016-01-26 16:31:02
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machao8405
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性别: GG
专业: 植物学
反转录用的oligodt 还是随机引物?
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2016-01-30 21:31:04
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