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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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小小技术官

木虫 (正式写手)

[交流] 虫友们 有没有 转膜 击穿 PVDF膜的情况

100V 恒流(240mA左右)1h  冰上

Glycine 2.9g Tris 5.8g SDS 0.37g    200ml 甲醇 (预先配好的10×,稀释后加甲醇的)

今天转了两次, 第一次转完后,PVDF膜上没有maker ,在滤纸上反而隐约有。

以为是电极插反了。

随后做了第二次,确认电极连接正确,缩短转膜时间 40min,发现maker直接透过PVDF膜,到滤纸上了!!而且电转液是在转完后还是凉的,平时都是热的,冒热气那样。

感觉做了很多WB了,头一次这么让人费解。

求大神支招。
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-17 11:30:29
我转膜不加SDS,不过大体步骤和楼主差不多
但是转膜蛋白会穿过PVDF膜并不稀奇。我以前放两张膜转膜试过,第二张膜上也能显出条带,只不过比第一张膜要浅很多
楼主marker都完全跑到滤纸上,这么夸张倒是从来没见过
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-12-17 01:39:46
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searush

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人觉得应该是转膜过头了   建议你80V  试试
学术研究
3楼2014-12-17 09:10:56
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小小技术官

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-12-17 01:39:46
我转膜不加SDS,不过大体步骤和楼主差不多
但是转膜蛋白会穿过PVDF膜并不稀奇。我以前放两张膜转膜试过,第二张膜上也能显出条带,只不过比第一张膜要浅很多
楼主marker都完全跑到滤纸上,这么夸张倒是从来没见过 ...

嗯 今天转膜弄上他两张PVDF膜,再击穿就只能换电转液了,那么多10×电转液,可不能可惜了
谢谢
生活是一面镜子,要笑着面对!
4楼2014-12-17 11:00:50
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