24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2294  |  回复: 3

小小技术官

木虫 (正式写手)

[交流] 虫友们 有没有 转膜 击穿 PVDF膜的情况

100V 恒流(240mA左右)1h  冰上

Glycine 2.9g Tris 5.8g SDS 0.37g    200ml 甲醇 (预先配好的10×,稀释后加甲醇的)

今天转了两次, 第一次转完后,PVDF膜上没有maker ,在滤纸上反而隐约有。

以为是电极插反了。

随后做了第二次,确认电极连接正确,缩短转膜时间 40min,发现maker直接透过PVDF膜,到滤纸上了!!而且电转液是在转完后还是凉的,平时都是热的,冒热气那样。

感觉做了很多WB了,头一次这么让人费解。

求大神支招。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

生活是一面镜子,要笑着面对!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-12-17 11:30:29
我转膜不加SDS,不过大体步骤和楼主差不多
但是转膜蛋白会穿过PVDF膜并不稀奇。我以前放两张膜转膜试过,第二张膜上也能显出条带,只不过比第一张膜要浅很多
楼主marker都完全跑到滤纸上,这么夸张倒是从来没见过
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-12-17 01:39:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

searush

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
个人觉得应该是转膜过头了   建议你80V  试试
学术研究
3楼2014-12-17 09:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小技术官

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-12-17 01:39:46
我转膜不加SDS,不过大体步骤和楼主差不多
但是转膜蛋白会穿过PVDF膜并不稀奇。我以前放两张膜转膜试过,第二张膜上也能显出条带,只不过比第一张膜要浅很多
楼主marker都完全跑到滤纸上,这么夸张倒是从来没见过 ...

嗯 今天转膜弄上他两张PVDF膜,再击穿就只能换电转液了,那么多10×电转液,可不能可惜了
谢谢
生活是一面镜子,要笑着面对!
4楼2014-12-17 11:00:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小技术官 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +6 芋泥小铃铛 2026-03-28 6/300 2026-03-28 14:15 by Ainin_
[考研] 349求调剂 +6 杰斯塔里斯 2026-03-21 6/300 2026-03-28 13:12 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 286求调剂 +12 PolarBear11 2026-03-26 12/600 2026-03-28 12:14 by zllcz
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +6 1428151015 2026-03-27 6/300 2026-03-28 03:51 by fmesaito
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 317求调剂 +7 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 7/350 2026-03-27 02:29 by fmesaito
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 材料与化工328分调剂 +6 。,。,。,。i 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:30 by 418490947
[考研] 各位老师您好:本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见