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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

[求助] 请问指导western blot条带的净光密度值,怎么求该样的蛋白浓度? 已有3人参与

请问指导western blot条带的净光密度值,怎么求该样的蛋白浓度?
今天做western blot时,净光密度值(好像又叫灰度值)知道后,怎么求该样的蛋白浓度?
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世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
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joblee

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+2, ★有帮助 2014-12-04 09:21:25
该方法的原理是在一定的浓度范围内,蛋白质含量与条带光密度成正比关系。所以,你需要一个浓度已知的蛋白标准品做对照。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-03 22:19:25
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

引用回帖:
2楼: Originally posted by joblee at 2014-12-03 22:19:25
该方法的原理是在一定的浓度范围内,蛋白质含量与条带光密度成正比关系。所以,你需要一个浓度已知的蛋白标准品做对照。

我们主要是根据内参条带的光密度调整
世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
3楼2014-12-04 09:20:57
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+1, ★有帮助 2014-12-04 16:18:20
你这只能相对定量,除非你有标准品。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
4楼2014-12-04 09:44:45
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joblee

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小木虫刘树青 at 2014-12-04 09:20:57
我们主要是根据内参条带的光密度调整...

那要的话相对定量,无法得到蛋白的绝对浓度

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-12-05 07:06:35
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+2, ★有帮助 2014-12-05 18:48:24
单独的灰度值没任何意义,要进样品间的比较,比值才有用处。
6楼2014-12-05 08:47:49
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