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胰岛素体内样品处理 已有1人参与
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以下是我在文献中看到的胰岛素体内样品处理方法： 取10μl血浆样品加入到5mlEP管中，再加入1mlPBS（7.4），加入1ml二氯甲烷萃取，涡旋5min，简单的离心分层，置于干冰浴中，除去上清液，取0.8ml有机层转移至另一EP管，加入130μl 0.05N HCl反萃取有机层，涡旋和离心后，有机层在氮气流下吹干，取100μl等分样品进样。 问题：1.为什么用7.4的PBS？ 2.为什么加130μll 0.05N HCl？ 3.是直接吹有机层吗？吹的程度怎么掌握？ 4.蛋白质是怎么分离的？ 5.二氯甲烷的作用是让胰岛素进入到有机层里吗？ 6.蛋白分离的原理是什么？ 各位大神给予指点！！！  |
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