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xzy0425
新虫
(初入文坛)
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专业: 生物化学
[
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载体构建
已有4人参与
请问虫友们,在构建重组载体时,拿到原始环状质粒,除了要看酶切位点,还要考虑什么问题?请具体说说,谢谢!!!!!!!!!!!!!!跪求
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1楼
2014-12-02 19:04:55
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wushm388
银虫
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专业: 生物化学
引用回帖:
9楼
:
Originally posted by
coolkid2001
at 2014-12-03 21:32:16
不是去找书,而是要去仔细阅读你想使用的那个载体的厂家说明书。有时厂家会给一个简短版本的说明,内有载体图谱,抗性,酶切位点,质粒骨架主要构成等,这些信息对于熟手来说,足够了(例如GE公司的pGEX系列)。但 ...
讲的很不错。
补充一下:7. 分泌表达还是胞内表达?
8. 带标签吗?是何标签。
正如楼上几位所述,对于熟手来说,有质粒图的信息就足够了,新手的话,找一个内行人指点指点,很快就能入门的,并不很难。告诉人家你要表达什么基因?目的是什么?等等,内行人指点指点,你就都明白了。
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10楼
2014-12-04 09:40:39
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yuguiyan
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★
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xzy0425: 金币+1,
★
有帮助
2014-12-04 19:25:15
看是否有标签,结合你的实验目的看需要如何设计实验
[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼
2014-12-02 19:23:06
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coolkid2001
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★★★
很有帮助
2014-12-04 19:25:44
载体抗性。
另外,像pcDNA3.1这种真核表达载体,如果基因起始位置满足kozak序列规则,蛋白翻译效率会显著提高。
每个载体都有其说明书的,建议楼主仔细阅读。
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一入江湖岁月催
3楼
2014-12-02 21:46:05
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wushm388
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专业: 生物化学
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★
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★
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2014-12-04 19:26:01
质粒图,最好有目的基因序列。用之前双酶切实验检验,然后就可以进行后续实验了。
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4楼
2014-12-03 14:26:59
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