24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
查看: 2855  |  回复: 25
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

luchao507

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dulei

木虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by 曼舞流苏 at 2015-01-15 10:59:25
上下10度太多了吧,我上次做的梯度,上下也就差4度,差5度时候就出现了双峰。差更多时候就不只是双峰了,是很多很多的峰。。...

引物设计要设计好,你要保证引物设计的时候跟上下1000范围内没有计算出来的错配,这样退火温度根本可以不用考虑。我们设计的引物,回来后根本不用管Tm值,随便用45-70度任何一个温度,就都能P出来。当然我们会考虑引物长度的问题,如果引物在20bp左右,那么45-60度都能P出来,如果引物超过30bp,那么55-70度都可以P出来。
所以引物设计的好坏是整个PCR有没有非特异性条带的关键所在。
23楼2015-01-15 16:48:12
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

航帆

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
luchao507: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-24 21:20:38
有时候实验是个人品积累的过程……等人品攒够了,或许就出来了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-11-24 21:19:13
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
luchao507(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-25 13:13:24
换酶试一下,我有一次摸索温度用rTaq酶出了目的条带,在重复就出不来了,换Etaq也没出来,换LA就出了
3楼2014-11-25 07:55:43
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ixiaoye2012

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
luchao507(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-25 13:13:35
Tm42,这种结果也能信?给你个建议做一下降落PCR
就算大雨将整座城市颠倒,我也会给你拥抱
4楼2014-11-25 11:37:09
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见