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蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌菌液PCR前菌液处理用的溶菌酶浓度要多少合适 已有4人参与

我现在要做农杆菌的菌液PCR,由于细胞壁太厚要先用溶菌酶处理一下,浓度多少比较合适,处理温度和时间应该是多少
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xfxycy3090

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直接用把农杆菌煮沸,取上清就可以啦
2楼2014-11-13 10:23:26
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Neo2000

木虫 (著名写手)

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不用处理,直接PCR就好

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3楼2014-11-13 11:04:21
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蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-11-13 11:04:21
不用处理,直接PCR就好

那PCR的程序需要怎么设计啊,预变性时间要多久
4楼2014-11-13 14:32:32
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Neo2000

木虫 (著名写手)

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引用回帖:
4楼: Originally posted by 蓝色泡沫321 at 2014-11-13 14:32:32
那PCR的程序需要怎么设计啊,预变性时间要多久...

按大肠杆菌的整就好,没什么特别的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-11-13 17:48:18
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dongdekun

新虫 (初入文坛)

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95℃预变性时间延长到10min,然后按正常PCR进行即可!
6楼2014-11-14 13:49:43
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快乐农夫

木虫 (正式写手)

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正常PCR就行,不用什么溶菌酶也不用加什么变性时间,平时怎么做就怎么做,把农杆菌当普通模板就行,94度的温度比任何溶菌酶都来的有效

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7楼2014-11-14 13:59:11
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