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细胞不明原因死亡 已有1人参与
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本人细胞室因实验室水管爆裂,进过一次水,之后细胞就一直养不好。怀疑是进水后细胞室污染所致,随后细胞室用过氧乙酸进行熏蒸,接着用新洁尔灭擦拭地板,酒精擦拭超净台及培养箱等。过氧乙酸气味基本散去后开始重新养细胞。但依旧没有明显改善。实验室养的所有细胞的现象基本都一致,包括A549、4T1、B16、HepG2等癌细胞以及一株皮肤干细胞。目前细胞的生长情况如下:细胞生长速度普遍比以前来得慢,培养液颜色较清澈,培养液中的漂浮的死细胞相对以前来讲会多一些,但细胞还能生长。细胞传代需要较大的传代密度,否则细胞很难长起来。 另外,细胞必须每天都换液,一天不换液的话,细胞马上就死亡(细胞呈球状飘起,边缘很多尖刺,应该是凋亡细胞,而培养液颜色基本上没变成黄色;另一种现象是细胞飘起后个头明显变小,好像都皱起来了一样,细胞数量似乎变少了很多,培养液颜色也基本没变)。 呈梭状的干细胞频繁换液可保证生长,但有时候贴壁的细胞个体缩小了很多,这时候细胞就长的更慢了。前几代的细胞贴壁后细胞周围也还算清澈,没有什么细胞碎片或细胞泄漏物质;但是到了后面,培养液中会出现比较多的黑色的物质(可能是细胞死亡后聚集团块),飘在培养液中,而另一端与细胞壁连接,不太容易被PBS洗掉。这种黑色团块越多细胞就长得越慢。 请各位战友帮忙诊断一下是什么原因,是不是一种污染,还是其他原因?需要怎么处理啊?非常感谢! 这都好几个月了,整个实验室都不能正常做实验,该怎么毕业啊! |
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