应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » HRP标记抗体
302/3返回列表上一页123下一页
查看: 2985  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sfeqhl at 2014-11-19 17:43:44
我们用的高碘酸钠法，效价在1:5000到1:10000之间，当然你的抗体得好

嗯嗯，谢谢
回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
11楼2014-11-20 12:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可儿不苦

金虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sfeqhl at 2014-11-19 17:43:44
我们用的高碘酸钠法，效价在1:5000到1:10000之间，当然你的抗体得好

你的抗体效价是多少呢？我们用的是自己制备的小鼠腹水抗体，效价不高。
赞一下 回复此楼
幸福那一个美梦，是二人同行才有。
12楼2014-11-21 10:06:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfeqhl

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by 可儿不苦 at 2014-11-21 10:06:43
你的抗体效价是多少呢？我们用的是自己制备的小鼠腹水抗体，效价不高。...

我们抗体效价也挺高的，抗体不好标记效果也不好的。但也遇到过那种本身效价高，但是标记不好的，像这种就是你再重复标记也是标不好的。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
13楼2014-11-21 10:56:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by sfeqhl at 2014-11-19 17:43:44
我们用的高碘酸钠法，效价在1:5000到1:10000之间，当然你的抗体得好

嗯嗯，怎么判断抗体活性好不好呢
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
14楼2014-12-02 15:45:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ldnh at 2014-11-03 10:50:37
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团，一端和氨基反应，另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基，要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG，先用高碘 ...

您好！我用SMCC与IgG的氨基反应，用DTT还原HRP的S-S，仍旧没有反应，这是怎么回事呢？
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
15楼2014-12-02 15:48:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 可儿不苦 at 2014-11-21 10:06:43
你的抗体效价是多少呢？我们用的是自己制备的小鼠腹水抗体，效价不高。...

我们也是自己做的腹水纯化的抗体，效价用试纸条测了一下，无法判断精确的效价，只能粗略看一下是否有活性。你们用什么方法？
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
16楼2014-12-02 15:51:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

可儿不苦

金虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 15:51:19
我们也是自己做的腹水纯化的抗体，效价用试纸条测了一下，无法判断精确的效价，只能粗略看一下是否有活性。你们用什么方法？...

什么试纸？我们用间接ELISA测效价
赞一下 回复此楼
幸福那一个美梦，是二人同行才有。
17楼2014-12-02 15:54:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfeqhl

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
maweisimple: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-12-02 20:28:29
引用回帖:
14楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 15:45:42
嗯嗯，怎么判断抗体活性好不好呢...

我们是这样的，用elisa检测，包被抗原，然后用你那个待标记的抗体作为一抗，稀释一定的浓度梯度，然后看你的一抗，如果是鼠源二抗就用羊抗鼠HRP检测。我们一般都是从1ug/ml开始稀释，活性非常好的话到1ng/ml左右OD值可以达到2.0以上

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
18楼2014-12-02 16:09:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 可儿不苦 at 2014-12-02 15:54:30
什么试纸？我们用间接ELISA测效价...

胶体金试纸

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
19楼2014-12-02 20:27:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by sfeqhl at 2014-12-02 16:09:08
我们是这样的，用elisa检测，包被抗原，然后用你那个待标记的抗体作为一抗，稀释一定的浓度梯度，然后看你的一抗，如果是鼠源二抗就用羊抗鼠HRP检测。我们一般都是从1ug/ml开始稀释，活性非常好的话到1ng/ml左右OD ...

嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
20楼2014-12-02 21:05:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 maweisimple 的主题更新
302/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:25 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 16:25 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神：2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀？ +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭