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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » HRP标记抗体
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limichuan

金虫 (正式写手)

免疫学实验超人qq：858200882

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
maweisimple: 金币+1, ★有帮助 2014-12-03 08:17:20
引用回帖:
20楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 21:05:47
嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗
...

怎么感觉大家都没怎么做过这方面实验似的的呢。抗体制备一般都会测定效价，商业化的鼠单抗一般不会小于十万。标记后的活性是另一回事了，一般在几千到几万不等。现在通用的方法是高碘酸钠法，简单易行，成本低。
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本公司专业从事蛋白纯化，抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq：858200882
21楼2014-12-02 22:18:26
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maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by limichuan at 2014-12-02 22:18:26
怎么感觉大家都没怎么做过这方面实验似的的呢。抗体制备一般都会测定效价，商业化的鼠单抗一般不会小于十万。标记后的活性是另一回事了，一般在几千到几万不等。现在通用的方法是高碘酸钠法，简单易行，成本低。...

谢谢

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Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
22楼2014-12-03 08:17:07
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 21:05:47
嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗
...

可以啊，我们一般都是在标记前留点样，标记完后一起检测

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23楼2014-12-03 08:20:53
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 21:05:47
嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗
...

另外补充下，你如果待标记抗体是羊抗鼠的话，检测抗体本身效价时二抗可以用驴抗羊-HRP

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24楼2014-12-03 08:26:21
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ldnh

铜虫 (小有名气)
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15楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 15:48:34
您好！我用SMCC与IgG的氨基反应，用DTT还原HRP的S-S，仍旧没有反应，这是怎么回事呢？...

DTT修饰ＨＲＰ应该是无效的，无法得到自由巯基。没必要加一个SMCC在中间，可以氧化HRP分子上的糖环，得到醛基，再与IgG分子上的NH2反应，生成席弗碱，最后NaBH4还原，得到稳定的偶联产物。
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厚德载物，勤劳致富
25楼2014-12-03 13:34:52
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maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by ldnh at 2014-12-03 13:34:52
DTT修饰ＨＲＰ应该是无效的，无法得到自由巯基。没必要加一个SMCC在中间，可以氧化HRP分子上的糖环，得到醛基，再与IgG分子上的NH2反应，生成席弗碱，最后NaBH4还原，得到稳定的偶联产物。...

主要是smcc买完了，想要用上

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26楼2014-12-03 18:58:37
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huajiahu

金虫 (小有名气)
楼主用的是国外的HRP标记试剂盒吗？
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27楼2015-11-06 17:17:11
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maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
27楼: Originally posted by huajiahu at 2015-11-06 17:17:11
楼主用的是国外的HRP标记试剂盒吗？

是的。

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28楼2015-11-07 07:27:17
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huajiahu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
28楼: Originally posted by maweisimple at 2015-11-07 07:27:17
是的。
...

我在用国内标记试剂盒还可以用，不知道适不适合你，可以标记微量抗体。

发自小木虫IOS客户端
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29楼2015-11-07 22:47:55
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maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
29楼: Originally posted by huajiahu at 2015-11-07 22:47:55
我在用国内标记试剂盒还可以用，不知道适不适合你，可以标记微量抗体。
...

谢谢！

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30楼2015-11-08 08:20:45
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