【答案】应助回帖

本公司专业从事蛋白纯化，抗体制备等免疫实验技术服务。欢迎咨询qq：858200882

21楼2014-12-02 22:18:26

maweisimple

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 3764.2
散金: 14
红花: 2
帖子: 238
在线: 43.1小时
虫号: 940969
注册: 2010-01-12
性别: MM
专业: 抗体工程学

引用回帖:

21楼: Originally posted by limichuan at 2014-12-02 22:18:26
怎么感觉大家都没怎么做过这方面实验似的的呢。抗体制备一般都会测定效价，商业化的鼠单抗一般不会小于十万。标记后的活性是另一回事了，一般在几千到几万不等。现在通用的方法是高碘酸钠法，简单易行，成本低。...

谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.

22楼2014-12-03 08:17:07

sfeqhl

铁虫 (正式写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 1087.9
散金: 153
红花: 6
帖子: 942
在线: 157.2小时
虫号: 2604963
注册: 2013-08-19
性别: MM
专业: 免疫生物学

引用回帖:

20楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 21:05:47
嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗
...

可以啊，我们一般都是在标记前留点样，标记完后一起检测

[ 发自小木虫客户端 ]

23楼2014-12-03 08:20:53

sfeqhl

铁虫 (正式写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 1087.9
散金: 153
红花: 6
帖子: 942
在线: 157.2小时
虫号: 2604963
注册: 2013-08-19
性别: MM
专业: 免疫生物学

引用回帖:

20楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 21:05:47
嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗
...

另外补充下，你如果待标记抗体是羊抗鼠的话，检测抗体本身效价时二抗可以用驴抗羊-HRP

[ 发自小木虫客户端 ]

24楼2014-12-03 08:26:21

ldnh

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 407.5
帖子: 143
在线: 107小时
虫号: 1859287
注册: 2012-06-14
性别: GG
专业: 抗体工程学

引用回帖:

15楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 15:48:34
您好！我用SMCC与IgG的氨基反应，用DTT还原HRP的S-S，仍旧没有反应，这是怎么回事呢？...

DTT修饰ＨＲＰ应该是无效的，无法得到自由巯基。没必要加一个SMCC在中间，可以氧化HRP分子上的糖环，得到醛基，再与IgG分子上的NH2反应，生成席弗碱，最后NaBH4还原，得到稳定的偶联产物。

厚德载物，勤劳致富

25楼2014-12-03 13:34:52

maweisimple

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 3764.2
散金: 14
红花: 2
帖子: 238
在线: 43.1小时
虫号: 940969
注册: 2010-01-12
性别: MM
专业: 抗体工程学

引用回帖:

25楼: Originally posted by ldnh at 2014-12-03 13:34:52
DTT修饰ＨＲＰ应该是无效的，无法得到自由巯基。没必要加一个SMCC在中间，可以氧化HRP分子上的糖环，得到醛基，再与IgG分子上的NH2反应，生成席弗碱，最后NaBH4还原，得到稳定的偶联产物。...

主要是smcc买完了，想要用上

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.

26楼2014-12-03 18:58:37