应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » HRP标记抗体
53/1返回列表
查看: 2652  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

[求助] HRP标记抗体 已有4人参与

大家好，最近做HRP标记抗体，参照的是Bioconjugate Techniques,3rd Edition和Thermo的sulfo-SMCC的说明书，可是经过ELISA检测，完全没标上。请问大家有做过这个标记的吗？是什么样的流程呢？哪个步骤是最关键的环节？
拜托拜托~
回复此楼

» 猜你喜欢
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
1楼 2014-11-02 21:57:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by maweisimple at 2014-12-02 21:05:47
嗯嗯，我们标记的是羊抗鼠，包被的是小鼠抗体，可是都是我们自己做的，能同时验证活性吗
...

另外补充下，你如果待标记抗体是羊抗鼠的话，检测抗体本身效价时二抗可以用驴抗羊-HRP

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
24楼2014-12-03 08:26:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
maweisimple: 金币+4, ★★★很有帮助, 简洁明了，谢谢！ 2014-11-03 13:38:36
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团，一端和氨基反应，另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基，要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG，先用高碘酸钠氧化HRP，产生醛基，醛基能和IgG上富含的氨基生成席弗碱反应，从而达到耦联目的。
赞一下 回复此楼
厚德载物，勤劳致富
2楼2014-11-03 10:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ldnh at 2014-11-03 10:50:37
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团，一端和氨基反应，另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基，要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG，先用高碘 ...

太悲催了，SMCC已经买完了，请问还有挽救的余地吗？
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
3楼2014-11-03 13:39:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by maweisimple at 2014-11-03 13:39:06
太悲催了，SMCC已经买完了，请问还有挽救的余地吗？...

SMCC一般不用于抗体耦联HRP，其他酶类可以用这种方法。商品化的HRP标记二抗一般都用高碘酸钠氧化HRP，再耦联IgG.你可以试试这个方法。你是用来标记一抗吗？
赞一下 回复此楼
厚德载物，勤劳致富
4楼2014-11-03 14:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学，材料，环境类求调剂 +3 考研版棒棒 2026-03-02 3/150 2026-03-02 16:10 by @飒飒飒飒
[考研] 求调剂 +9 yunziaaaaa 2026-03-01 10/500 2026-03-02 15:18 by 半截的诗0927
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 9/450 2026-03-02 13:31 by njzyff
[考研] 291 求调剂 +3 化工2026届毕业� 2026-03-02 3/150 2026-03-02 12:55 by houyaoxu
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +6 ieewxg 2026-02-25 7/350 2026-03-02 12:44 by stidwellNK
[考研] 292求调剂 +7 yhk_819 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:43 by 无际的草原
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by lature00
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 0854复试调剂 276 +4 wmm9 2026-03-01 6/300 2026-03-02 09:28 by 热情沙漠
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭