应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » HRP标记抗体
52/1返回列表
查看: 2659  |  回复: 29
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)

[求助] HRP标记抗体 已有4人参与

大家好，最近做HRP标记抗体，参照的是Bioconjugate Techniques,3rd Edition和Thermo的sulfo-SMCC的说明书，可是经过ELISA检测，完全没标上。请问大家有做过这个标记的吗？是什么样的流程呢？哪个步骤是最关键的环节？
拜托拜托~
回复此楼

» 猜你喜欢
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
1楼 2014-11-02 21:57:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 可儿不苦 at 2014-11-21 10:06:43
你的抗体效价是多少呢？我们用的是自己制备的小鼠腹水抗体，效价不高。...

我们也是自己做的腹水纯化的抗体，效价用试纸条测了一下，无法判断精确的效价，只能粗略看一下是否有活性。你们用什么方法？
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
16楼2014-12-02 15:51:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
maweisimple: 金币+4, ★★★很有帮助, 简洁明了，谢谢！ 2014-11-03 13:38:36
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团，一端和氨基反应，另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基，要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG，先用高碘酸钠氧化HRP，产生醛基，醛基能和IgG上富含的氨基生成席弗碱反应，从而达到耦联目的。
赞一下 回复此楼
厚德载物，勤劳致富
2楼2014-11-03 10:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maweisimple

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ldnh at 2014-11-03 10:50:37
1.HRP分子上缺少能反应的氨基。2.SMCC是一种异型双功能基团，一端和氨基反应，另一端和巯基反应。3.天然IgG上也缺少能反应的自由巯基，要利用DTT或其他一些试剂修饰出能反应的自由巯基。4.一般HRP标记IgG，先用高碘 ...

太悲催了，SMCC已经买完了，请问还有挽救的余地吗？
赞一下 回复此楼
Ifyouwantsomething,setitfree.Ifitcomesback,itisyours.Ifitdoesn't,itisnever.
3楼2014-11-03 13:39:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ldnh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by maweisimple at 2014-11-03 13:39:06
太悲催了，SMCC已经买完了，请问还有挽救的余地吗？...

SMCC一般不用于抗体耦联HRP，其他酶类可以用这种方法。商品化的HRP标记二抗一般都用高碘酸钠氧化HRP，再耦联IgG.你可以试试这个方法。你是用来标记一抗吗？
赞一下 回复此楼
厚德载物，勤劳致富
4楼2014-11-03 14:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！ +3 likeihood 2026-03-02 6/300 2026-03-02 18:44 by likeihood
[考研] 299求调剂 +4 kkcoco25 2026-03-02 4/200 2026-03-02 18:04 by barlinike
[考研] 085600求调剂 +3 LRZZZZZZ 2026-03-02 3/150 2026-03-02 16:58 by zeng1010
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +12 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 12/600 2026-03-02 16:18 by youmomaoyan
[考研] 295求调剂。一志愿报考郑州大学化学工艺学硕，总分295分 +5 yl1 2026-03-02 5/250 2026-03-02 15:24 by sucesssucess
[考研] 0856化工专硕求调剂 +15 董boxing 2026-03-01 15/750 2026-03-02 15:06 by 晃晃不许晃
[考研] 290分材料工程085601求调剂 数二英一 +3 llx0610 2026-03-02 3/150 2026-03-02 14:15 by yc258
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 9/450 2026-03-02 13:31 by njzyff
[考研] 0805总分292，求调剂 +8 幻想之殇 2026-03-01 8/400 2026-03-02 12:51 by 无际的草原
[考研] 材料工程274求调剂 +4 Lilithan 2026-03-01 4/200 2026-03-02 12:06 by yuchj
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 275求调剂 +3 L-xin? 2026-03-01 6/300 2026-03-02 10:22 by 热情沙漠
[考研] 材料工程269求调剂 +3 白刺玫 2026-03-02 3/150 2026-03-02 09:25 by 一休哥FU
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭