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| 请问大家用cDNA-aflp法，跑聚丙烯酰胺凝胶用的什么电泳槽啊？多大的胶板？ |
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4楼2014-11-03 14:00:20
2楼2014-11-02 20:27:51
dongdekun
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
NSDSKY_LZM(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-11-05 14:20:41
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1）AFLP用测序胶电泳槽，尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ura-PAGE）。下面是我们用的电泳槽技术参数： 玻璃面积（W×L）：380×320（mm） 凝胶面积（W×L）：350×300（mm） 凝胶厚度：0.4（mm） 样品通量：（0.4mm厚）68鲨鱼齿；（0.4mm厚）100鲨鱼齿（选配） 缓冲液容积：～1500（ml） 外形尺寸（L×W×H）：406×176×400（mm） 2）一般Ura-Page的时候，我是不放Marker的；找到差异后，回收条带，PCR扩增，再用琼脂糖电泳，点Maker看大小，或者直接测序。普通Marker变性也可以用于参考，但经验表明不是非常准确。 3）cDNA-AFLP，假阳性非常非常高，有条件建议使用更先进的技术，有money直接交给公司来做。 |
3楼2014-11-03 12:39:25
dongdekun
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5楼2014-11-03 22:56:53