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qoocha

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助 MTT 空白孔细胞生长6天突然死亡，有图！ 已有1人参与

请各位虫友提点一下，
    第一张图是进行7天MTT空白孔细胞生长5天后的形貌，而第二张图是生长6天的形貌，究竟是什么原因导致细胞一天就死亡，关键是不是形貌圆球，而是粘附着破细胞膜死亡，初步估计是培养基问题，后面用这培养基培养另一盒细胞证明培养基有问题，但细胞生长了1天半还是生长情况良好。对于MTT实验，之前也是用这培养基的，但在第5天换液后一天，就出现第二张图的情况，而我们实验室是使用吸痰器吸走废液的，是不是本人吸痰器的管贴到培养孔板底部，因吸力过大把细胞吸破，因为使用的是48孔板。请各位提点一下。

求助 MTT 空白孔细胞生长6天突然死亡，有图！
20141027145257636-5D-MTT-4-jpg1.jpg


求助 MTT 空白孔细胞生长6天突然死亡，有图！-1
20141028221017285-mtt-6d-jpg.jpg
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1楼 2014-10-31 11:16:02
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小勋

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qoocha: 金币+10, ★有帮助 2014-11-11 20:48:08
你的细胞状态本来就不好，视野内活着的没几个。。。可能是细胞分泌物过多影响细胞生长；或者建议检查一下培养箱条件是否出现波动；不过极有可能是感染。。。
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3楼2014-11-01 08:00:47
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qoocha

新虫 (初入文坛)
还有，我们在进行1，3，5天的MTT时，也迅速地看了下显微镜，细胞内明显有蓝色晶体填充，但7天的MTT只有透明的晶体在空白孔内，这说明了细胞确定死了，而样品组的OD值基本与空白孔的差不多。
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2楼2014-10-31 11:25:13
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qoocha

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小勋 at 2014-11-01 08:00:47
你的细胞状态本来就不好，视野内活着的没几个。。。可能是细胞分泌物过多影响细胞生长；或者建议检查一下培养箱条件是否出现波动；不过极有可能是感染。。。

感染的话，那最起码显微镜下能看到细菌等污染物，但每个孔都看过，基本很干净，培养箱的话气体刚换了2-3星期了，基本培养箱是稳定的，因为培养箱现在只有我在用，没有其它人的细胞或样品在里面，因为我们细胞间整天开空调，所以应该不会有变化。但我感觉我的细胞因为培养了5天了，细胞仍然稀的话，细胞增殖慢，会不会细胞凋亡而自己崩坏？
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4楼2014-11-01 21:36:09
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