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紫色的风

银虫 (小有名气)

[交流] 大肠杆菌电转化

请教
1、大肠杆菌电转化感受态细胞,怎样制备?用甘油或者冰水清洗?
2、怎样保存?
3、怎样调控感受态浓度?
4、电转的时候感受态体积与电转杯的规格有什么要求?

谢谢
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hemigu

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
图片里给出了电转感受态的制备方法。我们一般用的是冰的灭菌超纯水洗两次之后,最后一次再用10%的甘油洗。离心的转数和时间可以调整。
浓度的话,一般用你做好的感受态,测OD值,然后涂平板计数,确定一下1OD大概有多少个菌,然后再把浓度调整到我给的图片里要求的浓度范围内。
保存的话,用液氮速冻之后,放在-78度冰箱里就可以了。
至于点转杯规格,一般我们用的是0.1cm的杯子,100uL的感受态。可以根据电转仪说明书上面的要求调整。
大肠杆菌电转化
1.jpg


大肠杆菌电转化-1
2.jpg

2楼2016-01-27 16:42:26
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