| 查看: 1331 | 回复: 3 | ||
[求助]
细胞免疫荧光求助
|
|
细胞免疫荧光实验步骤： 1. 生长在盖玻片上的细胞小心用PBS清洗2次； 2. 4%多聚甲醛室温下固定（15-30min）; 3. PBS清洗3次，每次5min; 4.0.1%Tritonx-100 通透30min，PBS洗三遍。 5. 封闭液封闭 (3%的BSA-牛血清白蛋白)的PBS 37度30min-1h， 6.弃去封闭液不需要清洗，加一抗，4度湿盒过夜或者37度1-2h； 7. PBS洗3次，每次5-10min； 8. 加荧光标记的二抗，37度避光孵育1h或者室温2小时; 9. PBS洗3次，每次5min，注意避光操作。 10. 最后封片，激光共聚焦观察拍照。 注：如果需要染核在第8和9步骤之间加一步DAPI染色，DAPI室温5min效果很好。 DAPI染细胞核的时候，老是出现一些乱七八糟的现象，求高手帮忙解疑！  141017-0006.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有5人回复
-
看来今天不会放榜了？
已经有10人回复
-
时间戳又变了
已经有19人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有14人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有13人回复
-
人气不行了
已经有7人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有18人回复
-
感觉是下周放榜了
已经有12人回复
-
我面上完蛋了
已经有8人回复
-
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有25人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 免疫荧光染色固定几天后在染色可以不？
已经有7人回复
- 第一次做细胞培养，这是我刚接种与96孔板细胞的状况，是否正常？
已经有9人回复
- RAW264.7细胞复苏总是失败
已经有7人回复
- 间接免疫荧光定位染色步骤中甲醇的作用
已经有8人回复
- 关于DAPI染色的问题
已经有5人回复
- 请教，细胞染色的问题
已经有15人回复
- 有人养过HL-60细胞吗？或者养过某些悬浮细胞~
已经有15人回复
- 微藻细胞的荧光染色怎么做？
已经有4人回复
- 细胞免疫荧光固定
已经有4人回复
- 免疫荧光一抗可以与目的蛋白是相同种属吗
已经有6人回复
- 组织切片免疫荧光
已经有6人回复
- 细胞死亡染色材料
已经有7人回复
- 免疫组化与免疫荧光方法及常见问题分析
已经有325人回复
- 请问免疫荧光双标一抗二抗可以同时加入吗
已经有4人回复
- 【求助】BSA的荧光
已经有14人回复
- 【求助/交流】免疫荧光的问题 。。
已经有17人回复
- 【分享】细胞爬片全过程经验总结
已经有27人回复
- 【求助】怎样对材料上的细胞做荧光染色
已经有7人回复
2楼2014-10-24 11:04:30
3楼2014-11-12 09:57:17
4楼2014-12-01 19:02:10
40