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肠道细菌定量检测
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请教各位虫友，我现在已经从小鼠肠道内容物提取出了细菌总DNA, 后面想用荧光定量的方法检测不同小鼠肠道菌群种类和数量的差异性，具体点步骤应该怎么操作呀？ 我看了下相关的文章，但是有很多地方都不是很懂，说是先先检测下DNA的A260/A280，用通用引物扩增出16S rDNA序列，以及用各种细菌的特异性引物进行PCR扩增，电泳检测。还需要连接载体，进行感受态细胞转化，蓝白斑筛选（这个过程是不是两三天就可以完成呢？）。还有用什么来制作标准曲线呢，是直接用空白组的样品进行梯度稀释，还是从细菌标准样品提取DNA，梯度稀释？思维比较乱，求大神帮忙理一下，感谢！！ |
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