24小时热门版块排行榜    

查看: 3050  |  回复: 22

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 海之草 at 2014-10-21 12:38:22
片段很长吗?质粒正反测个序就知道什么情况了。

去测序了已经,估计又失败; 
11楼2014-10-21 21:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流氓一个

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们实验室也有酶切验证正确,PCR验证没有P出条带的,目前还没解决,准备再PCR一次看看
我有我人生
12楼2014-10-23 10:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我就是保哥哥: 金币+2, 有帮助 2014-10-23 16:28:49
楼主,PCR体系没看到你加的酶
首先你分析一下载体的酶切位点,然后PCR时有个阳性对照,酶切设阴性对照了吗?
13楼2014-10-23 11:19:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我就是保哥哥: 金币+2, 有帮助 2014-10-23 16:28:21
楼主 是这样的
酶切的可信度大于PCR,小于测序

你可以送几个样品去测序

另外 你说你P不出来并列出了体系 但是并没有详细说明的引物的位置信息等

你有没有将连接前的“空质粒”作为对照呢?
未完成
14楼2014-10-23 15:27:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 流氓一个 at 2014-10-23 10:58:44
我们实验室也有酶切验证正确,PCR验证没有P出条带的,目前还没解决,准备再PCR一次看看

你们酶切验证切下带的概率大吗
15楼2014-10-23 16:26:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-10-23 15:27:03
楼主 是这样的
酶切的可信度大于PCR,小于测序

你可以送几个样品去测序

另外 你说你P不出来并列出了体系 但是并没有详细说明的引物的位置信息等

你有没有将连接前的“空质粒”作为对照呢?

哈哈哈,这个我后来做了,空质粒也切下带了,晕晕晕,,,是不是被污染了?
16楼2014-10-23 16:28:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

灰血动物

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 我就是保哥哥 at 2014-10-23 16:28:07
哈哈哈,这个我后来做了,空质粒也切下带了,晕晕晕,,,是不是被污染了?...

空质粒的带跟你挑的克隆比大小如何。。。
未完成
17楼2014-10-24 09:42:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流氓一个

金虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 我就是保哥哥 at 2014-10-23 16:26:58
你们酶切验证切下带的概率大吗...

不大
我有我人生
18楼2014-10-24 15:00:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 灰血动物 at 2014-10-24 09:42:38
空质粒的带跟你挑的克隆比大小如何。。。...

空质粒的带肯定跑的快一些
19楼2014-10-24 16:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
我就是保哥哥(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-24 20:37:11
首先:为什么不直接送一个测序?
其次,质粒做模板的时候,量太大的话是扩不出条带的。一般是50ul体系的话质粒浓度20ng作用。加的多是扩不出。做PCR之前模板是需要测浓度的。不是说加多少微升。
很给力
20楼2014-10-24 16:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我就是保哥哥 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 二本跨考郑大材料306英一数二 +3 z1z2z3879 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:29 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见