24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3111  |  回复: 22
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

[求助] 连接转化后提质粒做酶切,可以切出带,做质粒PCR却P不出来,为什么??? 已有10人参与

质粒是PCM351,连接转化后挑菌落提质粒,然后做酶切跑胶,可以很明显的看到切下的条带,大小也正确,但用质粒做PCR后却跑不出条带,,这是什么原因啊,快疯了。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流氓一个

金虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by 我就是保哥哥 at 2014-10-23 16:26:58
你们酶切验证切下带的概率大吗...

不大
我有我人生
18楼2014-10-24 15:00:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 23 个回答

小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我就是保哥哥: 金币+2, 有帮助 2014-10-20 15:53:04
我也遇到过相同的情况,可以切出来,但是PCR的时候没有条带···我之所以做PCR,是因为我酶切之后的片段比预想的片段少大概1000bp,所以想用PCR鉴定一下,但没有P出来···个人认为酶切比PCR靠谱···
···
2楼2014-10-20 15:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我就是保哥哥

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小冀- at 2014-10-20 15:51:42
我也遇到过相同的情况,可以切出来,但是PCR的时候没有条带···我之所以做PCR,是因为我酶切之后的片段比预想的片段少大概1000bp,所以想用PCR鉴定一下,但没有P出来···个人认为酶切比PCR靠谱···

我是转化后挑了16个菌落做菌落PCR,但是P不出来或者非常非常模糊,所以我直接提质粒酶切了,奇怪的是酶切的16个样本都切出来了,就是说我的连接效率是100%,所以这个概率太高了,才做的质粒PCR,结果一个没有P出来。一般来说质粒PCR有结果,酶切没结果是可疑的;但我的酶切有结果,质粒PCR却没结果,这个是为什么呢,我想不通呀,,,压力好大
3楼2014-10-20 15:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谢铮

至尊木虫 (著名写手)

爱分子爱实验

请问你用的是什么引物?
博学好友张弛有度
4楼2014-10-20 16:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-04-14 6/300 2026-04-14 23:54 by Xurambo2014
[基金申请] 山东省基金2026 +7 jerry681 2026-04-08 9/450 2026-04-14 22:01 by 阿勇的篮球
[考研] 药学求调剂 +11 喽哈加油 2026-04-14 13/650 2026-04-14 21:14 by qingfeng258
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-11 13/650 2026-04-14 19:18 by Art1977
[考研] 0854调剂 +11 长弓傲 2026-04-12 14/700 2026-04-14 16:07 by 逆水乘风
[考研] 药学求调剂 +6 RussHu 2026-04-12 7/350 2026-04-14 15:16 by sxdj2
[考研] 本科211,报考085601-310分 +16 ararak 2026-04-13 16/800 2026-04-14 14:55 by Delta2012
[考研] 085600材料与化工349分求调剂 +16 李木子啊哈哈 2026-04-12 17/850 2026-04-14 09:11 by fenglj492
[考研] 生物学调剂 +11 小冉要努力 2026-04-10 13/650 2026-04-13 11:46 by 电化学及催化
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 11/550 2026-04-11 19:57 by 逆水乘风
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +11 LZH(等待调剂中 2026-04-10 11/550 2026-04-11 08:39 by zhq0425
[考研] 309求调剂 +14 wdhw 2026-04-10 15/750 2026-04-10 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 一志愿沪9,326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 初试分332,一志愿报考西北工业大学, +11 故人?? 2026-04-09 11/550 2026-04-09 21:54 by JineShine
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 生物学学硕,初试351分,求调剂 +4 …~、王…~ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
[考研] 求调剂,现在还能填的 +3 上岸小莹加油 2026-04-08 3/150 2026-04-08 14:30 by zhq0425
信息提示
请填处理意见