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359269798

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于噬菌体筛选方面的,高手请看进来

最近在做关于筛选噬菌体筛选,首先在酶联条上包被了5ug的蛋白,4度过夜后百分之5的脱脂奶粉封闭1小时,洗板后加入100ul的噬菌体室温孵育30min,洗板后加入百分之一的SDS室温孵育20min洗脱,结果在扩增时并没有菌体裂解,已经重复n次,结果都一样,求大神不吝赐教。
  1 用的噬菌体的滴度是10的11次方的
  2 同时包被了两种蛋白,都没有裂解现象
  3 用的封闭液是用脱脂奶粉+PBST配置的,百分之五
  4 请问整个过程需要无菌操作吗?
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