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180803014新虫 (小有名气)
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三亲结合问题 已有1人参与
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| 本人现在在做随机插入，用的是psc123这个质粒，受体菌（链霉素50ppm）：供体菌(卡那霉素50ppm)：协助菌（氯霉素35ppm）=10:1:1，第一次的时候结合的效率挺好的，从第二次开始，结合效率就很低，结合的菌长得很少，psc123在双抗平板上涂布上总长白色的小杂菌，但结合的上面没长（结合的菌与杂菌能明显分辨出来），后来换成了受体菌：供体菌：协助菌=2:1:1，结合的就直接不长了，平板上（双抗）长的都是小的杂菌，psc123的板子上也是，后来又换成了10:1:1，但是结合的还是不长，还是长满杂菌。以为是psc123不纯，可是已经纯化好多代了，就算有杂菌，难道就不结合了吗，直接把psc123在含链霉素的lb平板上划线，什么都没长，接到含链霉素的lb液体里也没长。现在准备吧链霉素的浓度提高，但不知道会不会对结合产生影响，现在好苦恼，不知道什么原因，忘大神指点一二！ |
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