应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为啥RT-PCR
61/1返回列表
查看: 923  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] 为啥RT-PCR 已有2人参与

做RT-PCR时，为了保证不是RNA的质量问题引起的失败，在反转录时就做了空白对照，在一组PCR管中加的是无菌水代替RNA，其余条件均不变，最后用两组实验合成的cDNA做模板，进行PCR反应，反应体系及程序完全一样，最后扩增的结果如图一。左一和左三是加了RNA的，左二和左四是加无菌水代替RNA的，右一是marker，奇怪的是我的目的条带大概就在1000，这个结果差不多正确，1500bp的marker，但为啥加了无菌水代替RNA的也能出目的条带？
    而且，楼主当时举得marker有些没有跑开，把胶又拿回去跑，最后再进行检测，就出现了图二，左二和左四降解比较明显。
    对于这种结果，我真是醉了，现在完全不知道问题出在哪里，请求各位大神支招，谢谢！

为啥RT-PCR
2014.10.13PCR结果.jpg


为啥RT-PCR-1
2014.10.13PCR延长电泳时间后的结果.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2014-10-13 15:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是反转录的时候对照就已经有CDNA 混进去了，要不解释不了了。、。
赞一下 回复此楼
学习再学习，努力再努力。
2楼2014-10-13 16:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 14:54:02
样品污染。而且阴性对照也不是这么搞滴。
水代替cDNA进行PCR，叫做NTC；逆转录时不含逆转录酶的样品之后进行PCR，叫做NC。
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-15 09:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-15 09:15:58
样品污染。而且阴性对照也不是这么搞滴。
水代替cDNA进行PCR，叫做NTC；逆转录时不含逆转录酶的样品之后进行PCR，叫做NC。

哦，我再试一下，弱弱地问一句，NTC和NC是什么意思啊？
赞一下 回复此楼
喜欢生物，所以想好好研究下去！
4楼2014-10-15 14:14:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wu-ke-da at 2014-10-15 14:14:09
哦，我再试一下，弱弱地问一句，NTC和NC是什么意思啊？...

no templete control, negative control
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-15 15:49:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
5楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-15 15:49:00
no templete control, negative control...

哦，知道了，非常谢谢！
赞一下 回复此楼
喜欢生物，所以想好好研究下去！
6楼2014-10-15 16:30:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wu-ke-da 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 8/400 2026-09-17 22:53 by cuPZTDXS3VOd
[有机交流] 各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？ 20+3 zapen 2026-09-15 7/350 2026-09-17 16:40 by 北京莱茵编辑
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 3/150 2026-09-17 16:27 by 0ngsZVSCTS7z
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 yaCh4X3wd045 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 12:39 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +8 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 11:27 by UAIjTRMuUFoj
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:16 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-17 04:16 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:14 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-16 17:27 by i3KBRD19ERkG
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 17:12 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭